ABSTRACTS

34. Jahrestagung der Deutschen Plastischen Chirurgen
8. Jahrestagung der Deutschen Ästhetisch-Plastischen Chirurgen
P4 In-vivo-Herstellung von großen Volumina von
3-dimensionalen Gewebekonstrukten zur Rekonstruktion
von Weichteildefekten
J. H. Dolderer, M. W. Findlay, J. Cooper-White, E. W. Thompson, W. A. Morrison
The Bernard O’Brien Institute of Microsurgery and Departments of Surgery (St. Vincent’s Hospital) and Chemical
Engineering, University of Melbourne, Australia
Für die Rekonstruktion von kongenitalen oder erworbenen Weichteildefekten
werden Gewebelappen mit großen Volumen gebraucht. Die
gegenwärtigen Techniken große Defekte nach Trauma und Tumorresektion
zu rekonstruieren sind im allgemeinen Muskel- und Omentum-
Lappen sowie freie Fettransplantation, alloplastische Implantate und
deepithelialisierte Haut-Fett-Lappen. Alle diese Techniken weisen
gewisse Einschränkungen und Nachteile auf. Die autologe Fetttransplantation
zeigt geringe Resultate. Die Reduzierung des adipösen Volumes
kommt durch eine insuffiziente Revaskularisation zustande. Besonders
3-dimensionale Gewebekonstrukte benötigen eine Vaskularisierung
für ihr Überleben, gerade im Hinblick auf eine in-vivo Transplantation.
Wir haben ein Tiermodell entwickelt, daß ein vaskuläres System in vivo
herstellt.
Methode: In dieser Studie untersuchten wir das Gewebwachstum mit und
ohne der Verwendung von Scaffolds sowie von angio-fibrotischem und
adipösem Gewebe in der Ratte sowie durch Optimierung der Gewebeproduktion
in einem Schweinmodell, um eine klinische Anwendung zu
erlangen. In dem Tiermodell der Ratte und dem Schwein wurde ein ligierter
Gefäßstiel mit einem Scaffold wird in eine Wachstumskammer eingebracht.
Magnetic Resonance Angiographien (MRA) wurden für das
nicht invasive Monitoring des Gewebewachstums und der Vaskularisierung
in der Kammer verwendet.
Ergebnisse: MRA konnte deutlich die Perfusion im vaskularisiertem Gewebe
demonstrieren und zwischen neuem Gewebe und dem Scaffold differenzieren,
das durch die Histologie zum Zeitpunkt der Entnahme bestätigt
wurde. Nach 6 Wochen war die gesamte Kammer mit neuem Gewebe
gefüllt sowie noch kleinere Mengen des Scaffolds vorhanden. Die Histologie
bestätigte das Waschtum von neuem adipösen Gewebe.
Diskussion: Diese Studie demonstriert das Techniken des Tissue Engineerings
für die Produktion von signifikanten Mengen an vaskularisiertem
und potenziell transferierbarem Gewebe vorhanden sind. Die weitere
Forschung wird nun auf die Herstellung von stabilem Gewebe gerichtet.
Vaskularisiertes adipöses Gewebe stellt v.a. für die Brustrekonstruktion
das beste Produkt dar.
P5 VEGF-Gentherapie reduziert Nekrosen bei kritisch
durchbluteten Lappenplastiken
R. Giunta, C. Taskov, T. Holzbach, P.S. Holm, T. Brill, B. Gänsbacher, E. Biemer
Abt. für Plastische und Wiederherstellungschirurgie und Abt. für Experimentelle Onkologie und
Therapieforschung, Klinikum r.d. Isar, Technische Universität München
Der Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) ist ein natürliches Protein,
welches die Einsprossung von Gefäßen unterstützt. Durch die
neuen Möglichkeiten der Gentherapie kann die cDNA dieses Faktors mit
einem Adenovirus in die Zelle transient eingeschleust werden und dort
ein vielfaches der natürlichen Konzentration an VEGF erzeugt werden.
Dieses bewirkt eine stark beschleunigte Angiogenese. In anderen Fachgebieten
haben bereits klinische Anwendungen in Phase I (ischämes Herzmuskelgewebe,
periphere AVK) die Wirksamkeit der Methode nachgewiesen.
Ziel der vorliegenden Arbeit ist die Zusammenfassung unserer
vorläufigen Ergebnisse bei kritisch durchbluteten Lappenplastiken.
Plastische Chirurgie 3 (Suppl. 1): 53 (2003)
Bei vier männlichen Sprague-Dawley Ratten wurde eine kranial gestielte
Transpositions-Lappenplastik mit einem Längen-zu-Breiten-Verhältnis
von 4:1 (8 cm x 2 cm) umschnitten und von der vorderen Bauchwand
abgelöst. Bei zwei Tieren wurde in die distale Lappenhälfte je 100ml
AdVEGF-cDNA subdermal injiziert. In der Kontrollgruppe wurde 0,9 %
NaCl injiziert. Nach 7 Tagen wurden das Ausmaß der Nekrosefläche
sowie die Größe des überlebenden Lappenareals mittels Bildanalyse absolut
und prozentual bestimmt.
Bei Kontrollen betrug die Fläche der eingeheilten Lappenplastik 4,4 (3,9
und 4,9) cm 2 und die Nekrosefläche 3,1 (1,9 und 4,3) cm 2 . Damit haben
bei Kontrolltieren durchschnittlich 59,8 % des Lappens überlebt. Bei Tieren,
die mittels VEGF Gentherapie behandelt wurden, betrug die Fläche
der eingeheilten Lappenplastik 10,3 (9,8 und 10,7) cm 2 und die Nekrosefläche
1,6 (1,4 und 1,7) cm2. Damit haben bei Versuchstieren durchschnittlich
90,8 % des Lappens überlebt.
Bereits diese vorläufigen Ergebnisse bestätigen die Effektivität der VEGF-
Gentherapie bei kritisch durchbluteten Lappenplastiken. In weiteren
Versuchen muß die Effektivität statistisch nachgewiesen werden und die
optimale Applikationsart sowie der beste Zeitpunkt für die Anwendung
gefunden werden. Möglicherweise läßt sich durch dieses neue Behandlungsverfahren
bei kritisch durchbluteten Lappenplastiken der Anteil
des überlebenden Lappens steigern und z.B. bei Lappenplastiken vom
„random-pattern“ Typ ein verbessertes Längen-zu-Breiten-Verhältnis
erreichen.
P6 Eine mikroangiographische Technik zur Quantifizierung
fasziokutaner Blutgefäße im athymischen Mausmodell.
S. Grzybowksi1 , T. Spanholtz1 , C. Niedworok1 , A. Maichle1 , I. Jasmund1 , K. Witting1 , B. Stöckelhuber2 ,
W.G. Xie1, A. Hartmann1 , B. Bucsky1 , P. Mailänder1 , H.-G. Machens1 1Plastische und Handchirurgie, Zentrum für Schwerbrandverletzte; Universitätsklinikum
Schleswig-Holstein/Campus Lübeck,
2Institut für Radiologie, Universitätsklinikum Schleswig-Holstein/Campus Lübeck
Abstracts
Aussagekräftige Studien zur funktionellen Angiogenese im Lappenmodell
oder zur Bestimmung der Vaskularisierung von Hauttransplantaten
benötigen eine möglichst genaue Quantifizierbarkeit auch kleinster Blutgefäße
im Zielgebiet und Kontrollgewebe. Obwohl die Mikroangiographie
für diese Zwecke ein geeignetes Verfahren darstellt, hat sie für das
in verschiedenen wissenschaftlichen Fragestellungen häufig verwendete
athymische Mausmodell bisher keine Anwendung gefunden. In dieser
Studie sollen die Technik und die erzielbaren Resultate vorgestellt werden.
Methodik: In der athymischen Maus (Durchschnittsgewicht 30-35 g) wird
nach Gewichtsbestimmung des anästhesierten Versuchstieres die linke
Arteria carotis aufgesucht und mit Hilfe einer 26G- Braunüle kanüliert.
1 (g Prostavasin/100 g Tier werden injiziert und 30 Sekunden später
1 ml Blut/100g Tier langsam entnommen. Nach Euthanasierung des Versuchstieres
wird eine Mischung aus flüssiger Gelantine, Bariumsulfat
und Tinte (Verhältnis 1 : 2 : 0,05) in einer Menge von 10 ml/100 g Tier
unter kontinuierlichem Druck über die kanülierte Arteria carotis injiziert.
Nach Lagerung über 24 Stunden bei 4° C wird das Zielgewebe chirurgisch
entnommen und mittels einer Weichstrahlröntgenröhre bestrahlt
(9-11 mAs bei 22-24 kV). Die entstandenen Bilder werden digitalisiert
und die dargestellten Blutgefäße durch computergraphischer Bildanalyse
quantifiziert (Gefäße/cm2 Gewebe).
Ergebnisse: In allen Tieren lassen sich mit der beschriebenen Technik eine
reproduzierbare und quantifizierbare Darstellung auch kleinster Blutgefäße
bis in den Kapillarbereich erreichen.
Schlußfolgerung: Die beschriebene Technik eignet sich für tierexperimentelle
Modelle zur Quantifizierung von fasziokutanen Blutgefäßen post mortem.
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