Abbott Times - ABBOTT Diagnostics

14 Focus
von Personen aus entsprechenden Endemiegebieten
beachtet werden. Die Abgrenzung der Krankheitsbilder
erfolgt in der Regel nur anhand klinischer und anamnestischer
Kriterien. Zur Beurteilung der Aktivität der
Infektion und der eventuellen Behandlungsbedürftigkeit
schließen sich dann Untersuchungen zum Nachweis von
nicht-treponemenspezifischen Lipoidantikörpern (VDRL-/
RPR-Test oder Cardiolipin-KBR) und T.-pallidum-spezifischen
IgM-Antikörpern (19S-IgM-FTA-ABS-Test, IgM-EIA
oder IgM-Immunoblot) an.
Bei der Syphilis-Erkennung galten viele Jahre der TPHAbzw.
der TPPA-Test als Tests der Wahl. In den letzten
Jahren sind jedoch zahlreiche alternative Testverfahren
für den Treponemen-Antikörpernachweis, insbesondere
Enzym-linked Immunosorbent Assays (ELISA) und
Chemilumineszenzassays, entwickelt worden. Diesem
Trend ist insofern Rechnung getragen worden, als
Immunoassays alternativ zum TPHA-/TPPA-Test für die
Syphilis-Routinediagnostik und als Suchtest im Rahmen
der Mutterschaftsvorsorge zugelassen wurden. Dies
entspricht auch den europäischen Consensus-Empfehlungen
zur Syphilisdiagnostik von 2001, die z. B. den
TPHA-Test und den Syphilis-ELISA sowohl als Screeningals
auch als Bestätigungsteste benennen. Die deutschen
Diagnostik-Empfehlungen von 1979 lassen diese Erweiterung
des Testspektrums mit der Feststellung zu, dass
für das Syphilis-Screening der TPHA oder vergleichbar
sensitive und spezifische Testverfahren angewendet
werden können. Daraus leitet sich die Forderung ab, dass
die Eignung eines Immunoassays als Syphilis-Screeningtest
z. B. für die Mutterschaftsvorsorge in Deutschland im
Vergleich zum TPHA-/TPPA-Test geprüft sein sollte, was
allein durch die CE-Zertifizierung nicht sichergestellt wird.
Eine entsprechende Vergleichsuntersuchung soll im
Folgenden für den TPPA-Test und den Architect
Syphilis TP Assay kurz zusammenfassend dargestellt
werden: Der TPPA-Test ist ein in der Regel manuell
durchgeführter indirekter Agglutinationstest. Er verwendet
als Antigen ein Ultraschallhomogenat von T. pallidum
(Nichols-Stamm), das an Gelatinepartikel gebunden ist.
Der Test erfasst simultan IgG- und IgM-Antikörper. Er
reagiert meist in der dritten Woche nach der Infektion
positiv. Die Testauswertung erfolgt durch visuelle Beurteilung
der Agglutinationsbilder. Ein subjektiver Einflussfaktor
bei der Beurteilung ist möglich, wobei die Erfahrung des
Untersuchers eine wichtige Rolle spielt. Der Test kann
qualitativ oder quantitativ durchgeführt werden. In der
Praxis wird heute im positiven Fall der TPPA-Titer in einem
zweiten Testansatz bestimmt, da die Titerhöhe im Kontext
mit den weiteren Befunden über die Beurteilung der
Aktivität der Infektion zur Befundbewertung herangezogen
und bei Verlaufsuntersuchungen die Antikörperkinetik
mitbewertet werden kann. Die Testspezifität wird je nach
Studiendesign zwischen 98 % und 100 % angegeben.
Die Testsensitivität im Stadium I der Syphilis beträgt im
Mittel 76 % (69 %–90 %), in den weiteren Krankheitsstadien
100 %. Auch Antikörper-Restbefunde nach ausreichend
behandelter Infektion werden in der Regel erkannt.
Der Architect Syphilis TP ist ein Chemilumineszenz-
Mikropartikelimmunoassay (CMIA, Abb. 4). Als Antigen
werden mit den rekombinanten Treponemenantigenen Tp
15, Tp 17 und Tp 47 beschichtete Mikropartikel eingesetzt.
In der Probe vorhandene Treponemen-Antikörper
werden an die beschichteten Partikel gebunden und
nachfolgend über eine Chemilumineszenz-Reaktion
detektiert. Die Messung erfolgt in relativen Lichteinheiten
(RLE). Die Menge der Treponemenantikörper in der Probe
ist direkt proportional zu den vom optischen System des
Architect-Immunoassay-Gerätes gemessenen RLE.
Der Nachweis von Antikörpern in der Probe erfolgt durch
den Vergleich des aus der Reaktion entstehenden Chemilumineszenz-Signals
mit dem Grenzwertsignal der letzten
Kalibrierung des Syphilis-Tests. Ist das Chemilumineszenzsignal
der Probe größer oder gleich dem Grenzwert­
ARCHITECT Syphilis TP vs. TPPA
22.0
ARCHITECT Syphilis TP
20.0
TPPA
18.0
16.0
14.0
12.0
10.0
3.0
2.5
2.0
1.5
Grenzwert
1.0
0.5
0.0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
Zeit (Monate)
+
Inkubation
Waschschritt
Mit rekombinanten Treponemapallidum
(TP)-Antigenen
(TpN15, TpN17, TpN47)
beschichtete Mikropartikel
Patientenprobe mit
Antikörpern gegen TP
S/CO
+
Pre-Trigger/Trigger
Akridinium-markiertes Konjugat
(Anti-Human-IgG und Anti-Human-IgM)
Inkubation
Chemilumineszenz-Reaktion
Waschschritt
Abb. 3:
Der ARCHITECT Syphilis TP Assay zeigt den gleichen
Verlauf wie der TPPA-Test an, nur mit höheren Signalen.
Abb. 4:
Testprinzip des ARCHITECT Syphilis TP Assay