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24 Labor aktuell 28 34 25 26 25 Jahre HIV-Diagnostik LABS ARE VITAL ist in Deutschland angekommen! 27 28 KIF6: Neuer Biomarker für die kardiologische Risikoabschätzung und Steuerung der Statin-Therapie Warum auf Respiratorische Viren testen? 30 32 34 35 36 37 38 39 Die mSystem-Familie in der molekularen Diagnostik – vielfältige RealTime-PCR-Assays auf einer einzigen Geräteplattform Hepatitis-C-Diagnostik – Screening und wichtiger Wegweiser in der HCV-Therapie Einsatzgebiete des ARCHITECT HCV Ag Assay ARCHITECT Vitamin D – vollautomatische Messung eines unterschätzten Vitamins Ist der falsche Troponin-Wert wirklich falsch? Abbott präsentiert seine Vielseitigkeit Lesezeichen: Hinweise auf aktuelle medizinische Fachliteratur 13. Weltkongress „Controversies in Obstetrics, Gynecology and Infertility“ 35 37 © Archiv Abbott, Wikipedia/ayako
25 Jahre HIV-Diagnostik Labor aktuell 25 Weltweit gibt es rund 33 Millionen HIV-positive Menschen. In Deutschland sind knapp 65.000 Menschen infiziert; jedes Jahr kommen rund 3000 hinzu. Die Krankheit ist eine Pandemie – sie tritt auf allen Kontinenten auf. Besonders viele Menschen sind in den Ländern des südlichen Afrika (Sub-Sahara) erkrankt. Steigende Infektionszahlen werden aus Osteuropa und Asien berichtet. Neben der Erforschung und Entwicklung effektiver Therapien muss daher weiter intensiv Prävention betrieben und sollten akute Infektionen so früh wie möglich diagnostiziert werden, um eine weitere Ausbreitung zu verhindern. Die ersten Auswirkungen des HI-Virus bemerkte man im Zeitraum von Oktober 1980 bis Mai 1981. In dieser Zeit wurde von fünf homosexuellen Männern berichtet, die unter einer Pneumocystis-carinii-Pneumonie litten. Zwei dieser Männer sind daran gestorben. Alle fünf Erkrankten hatten eine latente oder akute CMV-Infektion (Cytomegalie-Virus) und Candida-Befall im mucosalen Bereich. 1982 bekam das CDC (Centers for Disease Control) einen Bericht über ein 20 Monate altes Kleinkind, das nach mehreren Bluttransfusionen einen zellulären Immundefekt und opportunistische Infektionen entwickelt hatte. Außerdem wurde in diesem Jahr über eine Häufung von Pneumocystis-carinii- Fällen und Karposi-Sarkoma bei Homosexuellen berichtet. Ende 1982 wurde die Krankheit als „Erworbenes Immunschwäche-Syndrom“ (AIDS) bezeichnet. Als Risikogruppen wurden folgende Personen identifiziert: homo- und bisexuelle Männer, intravenös Drogenabhängige, Haitianer und Hämophilie-Patienten. Man ging davon aus, dass das infektiöse Agens sexuell und über Blut übertragen wird. Im Mai 1983 gelang es der Arbeitsgruppe von Dr. Luc Montagnier, ein Retrovirus aus Patienten mit AIDS zu isolieren. Montagnier nannte es „Lymphadenopathieassoziiertes Virus“ (LAV), heute bekannt als HIV-1: Gruppe M („Major“, „Montagnier“). Ein Jahr später, im Mai 1984, konnten Dr. Robert Gallo und seine Mitarbeiter ein Retrovirus aus den Lymphknoten eines an AIDS verstorbenen Patienten isolieren und Gallo nannte es „Humanes T-lymphotrophes Virus“ (HTLV-III). Er konnte zeigen, dass HTLV-III der Grund für AIDS ist. Außerdem etablierte er die Grundlage eines Screening-Tests, indem er zeigte, dass die Antikörper von AIDS-Patienten an HTLV-III Proteine binden. 1985 entstand die endgültige Nomenklatur und aus LAV und HTLV-III wurde HIV (Humanes Immundefizienz-Virus). Nachdem der Erreger der Krankheit identifiziert war, konnte die Entwicklung eines Screening-Tests beginnen. Am 19. Juni 1984 erhielt Abbott eine Virus-Zellkultur vom NCI (National Cancer Institute). Von Juni bis Oktober begann die Virusproduktion und die Etablierung einer Virusinaktivierung. Zusätzlich wurde nach dem besten Testformat für einen HIV-Screening-Test geforscht. Das Endresultat war ein Indirekter-Antikörper-Enzymimmunoassay, bei dem die Polystyrenpartikel mit viralem Lysat beschichtet waren. Das Konjugat bestand aus einem Anti-human-lgG-Antikörper an den eine Peroxidase gekoppelt war. Von Oktober bis November 1984 begannen die klinischen Studien. Dazu wurden mehr als 20.000 US-Blutspender gescreent. Es zeigte sich, dass 0,14 % davon mit HIV infiziert waren. Im Dezember 1984 wurde der Abbott-Test bei der FDA (Food and Drug Administration) eingereicht. Am 2. März 1985 erhielt Abbott die Zulassung für den ersten HIV-Test für das Blutspender-Screening und zur Diagnose, den Abbott HTLV-III EIA. Seitdem hat sich das HI-Virus stetig weiterentwickelt und dazu geführt, dass Abbott ebenfalls immer weiter forscht, um das Virus zu detektieren. 1986 wurde ein HIV-verwandtes Virus aus einem westafrikanischen Patienten isoliert, das HIV-2. Außerdem wurden neue Subtypen von HIV-1 gefunden: 1990 Subtyp O („Outlier“), 1998 Subtyp N („Near M“) und 2009 Subtyp P. 1994 wurde das globale HIV-Überwachungsprogramm zur Identifizierung/Charakterisierung von HIV-Varianten von Abbott eingeführt. Die primären Ziele dieses Programms sind: (1) das Monitoring und Auftreten von neuen Virus- Stämmen, (2) die Etablierung gut charakterisierter Probenpanels. Der Nutzen des Überwachungsprogramms ist vielfältig. Es liefert eine wissenschaftliche Grundlage für die Entwicklung von neuen Reagenzien und Testformaten. Verschiedene Panels helfen bei der Evaluierung der Testperformance und führen zu einer verlässlichen Detektion aller HIV-Infektionen. Seit das HI-Virus 1981 erstmals in den Blickpunkt der Wissenschaftler rückte, hat sich viel verändert. Inzwischen können moderne Testverfahren das Virusgenom in verschwindend geringer Zahl nachweisen und Antikörpertests selbst winzige Antikörpermengen aufspüren. Wenn vom HIV-Test gesprochen wird, ist gewöhnlich der Antikörpernachweis gemeint. Ein solcher HIV-Test erfasst Antikörper, die das Immunsystem der Infizierten gegen das Virus gebildet hat. Diese Antikörper werden meist innerhalb von drei bis zwölf Wochen nach einer Infektion gebildet. Mittlerweile sind Tests der vierten Generation verfügbar, die durch den kombinierten Nachweis von HIV-Antigen und -Antikörpern das diagnostische Fenster durchschnittlich auf 14 bis 17 Tage nach der Infektion verkürzen. Neben dem möglichst frühzeitigen Nachweis einer Infektion ist die Erkennung aller Subtypen für die Sicherheit eines HIV-Tests wesentlich. Die unterschiedlichen Subtypen des HI-Virus (HIV-1: Gruppe M: Subtypen A–K, Gruppe N, Gruppe O und P; HIV-2: Subtypen A–F) weisen grundsätzlich zwar ein spezifisches geographisches Verteilungsmuster auf, durch die Dynamik bei der Verbreitung von HIV werden sie sich aber langfristig vermischen. Ein frühzeitiges Erkennen einer HIV-Infektion ist daher sehr wichtig, um ein Weitertragen der Infektion zu verhindern, aber auch, um Behandlungsmöglichkeiten optimal zu nutzen. Ein rechtzeitiger Beginn der Therapie kann die Lebenserwartung entscheidend verlängern. n
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