Methodenskript
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<strong>Methodenskript</strong> AG Cypionka - 39 -<br />
Stop: 1<br />
Pause before cycle: 0<br />
b) Layout<br />
Eintragung der Proben- und Standard-Anordnung auf der Platte<br />
danach Button Check timing drücken (durchführen unter Menü Basic Parameters)<br />
-> Festlegung der Cycle time<br />
c) Concentrations/Volumes/Shaking<br />
Nicht wichtig!<br />
d) Injection/Timing<br />
Nicht wichtig!<br />
f) Timing Overview (One cycle)<br />
9) Button Ampel anklicken -> Test name: Reinhard Versuchnklicken<br />
è Einstellungen:<br />
a) Plate IDs<br />
ID1, ID2, ID3 Beschreibung des Laufs eintragen<br />
z.B. ID1 DNA-Bestimmung<br />
ID2 DGGE AB1<br />
ID3 PCR AB30<br />
No. Of executed runs since program start: (Zahl steigend)<br />
b) Gain Adjustment<br />
Required value: 90%<br />
Excitation Emission Gain<br />
485 520 =Variable<br />
nach 4,5 min Inkubation mit PicoGreen S1 (=höchster DNA-Standard) markieren<br />
und Button Gain Adjustment (well) klicken -> Gain-Berechnung<br />
c) Sample IDs<br />
Probenbezeichnungen eingeben<br />
10) Starten der Messung durch anklicken des Buttons Start test run (nach 5 min)<br />
11) Auswertung<br />
Button Excel drücken -> Testname wählen -> Anzeige der Raw data<br />
z.B. X1 0 0 0 für 485/520 nm<br />
Datei öffnen C:\Reinhard\DNA-Bestimmung Berechnungstabelle.xls (bitte einen eigenen<br />
Pfad anlegen und diese Datei nur kopieren)<br />
Raw data und Evaluation 96 Angaben reinkopieren