Biodisponibilidad de los flavonoides de la ... - Cerveza y Salud

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t r e s yor es el daño, menores y más cantidad de fragmentos se forman, apareciendo en la electroforesis una imagen en ovillo que migra rápidamente hacia la parte inferior (banda 2 de la electroforesis) (Figura 17). Sin embargo, cuando el DNA no ha sido degradado, la imagen electroforética es en forma de cohete (banda 1). Así pues, hemos incubado el DNA con los inductores de estrés oxidativo en ausencia y presencia de los dos tipos de cerveza, con y sin alcohol, a diferentes concentraciones. En los resultados obtenidos podemos observar que cuando el DNA está incubado en presencia de los inductores de estrés oxidativo la imagen es en forma de ovillo (banda 2), mientras que cuando en la incubación está presente, la cerveza se recupera la imagen de su control (banda 1). Esto se produce a partir de la concentración de 50 µl, mostrando un efecto máximo a 100 µl para ambos tipos de cerveza (bandas 3, 4, 6 y 7). Sin embargo, concentraciones bajas de cerveza (10 µl) no ejercen efecto protector. Estos resultados ponen de manifiesto el papel antioxidante que está ejerciendo la cerveza ante la degradación del DNA. 66 Figura 17. Separación en geles de agarosa de DNA de timo de ternera 1 2 3 4 5 6 7 8 (1) DNA solo incubado 1h a 37º C, (2) DNA más ascórbico 1mM y cobre (II) 100 µM; Como la calle 2 más: (3) 100 µL de cerveza rubia, (4) 50 µL de cerveza rubia, (5) 10 µL de cerveza rubia, (6) 100 µL de cerveza sin, (7) 50 µL de cerveza sin, (8) 10 µL de cerveza sin.
3.1.3.3. NIVELES DE 8-OHDG EN EL DNA DE TIMO DE TERNERA Otro método utilizado para observar la capacidad protectora de la cerveza frente al DNA oxidado, consiste en determinar la base modificada, 8 hidroxideoxiguanosina (8OHdG), originada durante el ataque del . OH al DNA. Para tal fin, el DNA fue tratado con ácido ascórbico y cobre en ausencia o presencia de 100 µl de cerveza (Tabla 3). Cuando el DNA se incubó solo, o en presencia de ambos tipos de cerveza, no se detectó la base modificada, sin embargo, cuando el DNA se incubó en presencia de ácido ascórbico y cobre, se detectaron niveles de 59,6 8OHdG/105dG. De forma diferente, cuando en el medio de incubación está presente la cerveza (100 mL) los niveles se reducen prácticamente a la mitad, 29,3 para la cerveza con alcohol y 22,7 para la cerveza sin alcohol. La presencia de cervezas en el sistema de ADN-cobre(II)ácido ascórbico inhibió significativamente el daño al DNA, siendo esta inhibición mayor en la cerveza sin alcohol, aunque no significativa estadísticamente con respecto a la cerveza con alcohol. Dichos resultados nos corroboran los anteriormente obtenidos por electroforesis. Tabla 3. Determinación de la 8OHdG/105 dG inducida por el ácido ascórbico y SO4Cu en el DNA de timo de ternera. Efecto protector de la cerveza 8OhdG/10 5 dG % Inhibición DNA ND DNA + Cer. con alcohol (100µL) ND DNA + Cer. sin alcohol (100µL) ND DNA + Asc-Cu 59,9 ± 1,8 DNA + Asc-Cu + Cer. con alcohol 29,3 ± 6,9* 51,6 ± 11,6 DNA + Asc-Cu + Cer. sin alcohol 22,7 ± 2,3* 62,0 ± 3,8 El ensayo en material y métodos. Los resultados están expresados en media ± SD de 10 experimentos diferentes. Para el cálculo de la significancia estadística se aplicó el test de la t´Student. *p
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