APPUNTI DI MICROBIOLOGIA - Istituto Comprensivo "G. Palatucci"

Giordano Perin; microbiologia 6: le analisi microbiologiche
◦ Si preleva il siero del soggetto.
◦ si inserisce un millilitro di siero del paziente in una provetta ottenendo una
diluizione 1 a 2.
◦ si trasferisce un millilitro del campione diluito in una seconda provetta
ottenendo una diluizione 1 a 4.
◦ si procede in questo modo in una diluizione a fattore 2.
◦ giungo ad una diluizione per esempio di 1 a 1024.
Si inserisce a questo punto l'agente patogeno sospettato nelle provette; se il
campione è positivo, sono presenti ANTICORPI che AGGLUTINANO L'AGENTE
IN QUESTIONE: a questo punto si valuta la DIVERSA REAZIONE DEI DIVERSI
CAMPIONI e si osserva che giunto ad un certo livello di diluizione, la
agglutinazione non avviene più in quanto gli anticorpi sono troppo diluiti per
eseguire tale operazione.
SI DEFINISCE TITOLO ANTICORPALE L'ULTIMO CAMPIONE A LIVELLO DEL QUALE
SI OSSERVA IL FENOMENO DI AGGLUTINAZIONE.
Questa tecnica si può eseguire anche per la diagnosi DI UNA MALATTIA IN
ATTO dove si osserva UNA VARIAZIONE DEL TITOLO ANTICORPALE NEL TEMPO
(sieroconversione) che aumenta in caso di infezione in corso.
Questo tipo di analisi non consente però di distinguere tra IgM E IgG.
PRECIPITAZIONE:
si tratta di una reazione antigene­anticorpo in cui l'antigene è solubile, non
corpuscolato, come una tossina per esempio. È una prova difficilmente
quantificabile e qualificabile in quanto si ottiene un semplice precipitato.
È possibile trasformare un test di questo tipo da una PRECIPITAZIONE ad una
AGGLUTINAZIONE, per esempio MONTANDO L'ANTIGENE SOLUBILE O L'ANTICORPO
SU UNA BASE SOLIDA, generalmente:
• un globulo rosso.
• Un supporto in lattice.
Tale operazione si può eseguire sia su anticorpi che su antigeni solubili.
Per sapere per esempio se un individuo è vaccinato contro il tetano si prova a
corpuscolare la tossina:
• si monta la tossina tetanica su una struttura cellulare, per esempio un globulo rosso
ma anche altre cose.
• Si inseriscono anticorpi di derivazione sierica del paziente.
• se sono presenti anticorpi agglutineranno rispetto alla tossina.
Analogamente a quanto accennato in precedenza, è possibile anche eseguire un titolo
ANTICORPALE su questo tipo di reazione valutando a differenti concentrazioni di anticorpo
la diversa agglutinazione.
Un esempio di diagnosi diretta potrebbe essere questo: i batteri capaci di dare una
MENINGITE sono tre, tutti presentano una capsula esterna, tale capsula viene esocitata
dal batterio per generare una risposta immunitaria contro un agente inerte, di
conseguenza È POSSIBILE CERCARE NEL LIQUOR DEL PAZIENTE I POLISACCARIDI
CARATTERISTICI DELLA CAPSULA IN QUESTIONE. La capsula, naturalmente, è composta di
polisaccaridi solubili, non corpuscolabili; ma è possibile agire in questo modo:
si utilizza una base solida, un globulo rosso o una placca di lattice.
si montano gli anticorpi contro il polisaccaride capsulare.
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