sodininkystė ir daržininkystė 31(3–4)

koncentracija, reakcijos laikas, organinio tirpiklio ir terpės pH įtaka pokolonėlineireakcijai. Koleva ir kt. (2000) nustatė, kad geriausios tiriamo junginio aptikimo ribospasiekiamos naudojant 10 -5 M koncentracijos DPPH metanolinį tirpalą ir reakcijaivykstant 30 sekundžių. Rūgštinė reakcijos terpė ir didelis organinio tirpiklio kiekismažino metodo jautrumą. Autorių nuomone, ESC-DPPH pokolonėlinis metodas yrapaprastas, pigus ir universalus antiradikalinio aktyvumo nustatymo kompleksiniuosemišiniuose metodas.Vėliau Dapkevičius ir kt. (2001) pagerino (apie 30 kartų) ESC-DPPH pokolonėliniometodo jautrumą. Mokslininkas degazavo DPPH tirpalą helio dujomis, optimizavoDPPH koncentraciją ir tiekimo greitį į pokolonėlę bei į sistemą papildomai įmontavoreagento tėkmės pulsacijos slopintuvą. Patobulintas metodas buvo pritaikytas laisvuosiusradikalus surišantiems junginiams nustatyti čiobrelių lapuose (Dapkevičiusir kt., 2002).Kosar ir kt. (2004) DPPH tirpalui tiekti į reaktorių vietoj pertraukiamo veikimošvirkštinio siurblio panaudojo nuolatinio veikimo ESC siurblį. Bandonienė ir Murkovic(2002) pritaikė 2,15 m ilgio 0,6 mm vidinio skersmens reakcijos kilpą. Sprendžiant išautorių straipsnyje pateiktų obuolių DPPH chromatogramų galima teigti, kad didesniovidinio skersmens reakcijos kilpa šiek tiek išplečia neigiamas smailes. Bandonienėir kt. (2005) kiekybiškai įvertino Salvia genties rūšyse ir Borago officinalis augalinėježaliavoje esančios rozmarino rūgšties antiradikalinį aktyvumą išorinės kalibracijosmetodu. Autoriai nustatė stiprią korealiaciją (R 2 = 0,98) tarp rozmarino rūgšties kiekioir augalinės žaliavos antiradikalinio aktyvumo.ESC-DPPH pokolonėlinio metodo universalumą puikiai iliustruoja Nuengchamnongir kitų (2005), Pukalsko ir kitų (2005), Exarchou ir kitų (2006) moksliniai darbai.Nuengchamnong ir kiti (2005) sujungė ESC-DPPH pokolonėlinį metodą su masiųspektrometrija (MS). Šią sistemą mokslininkai pritaikė vaistinio augalo Butea superbaekstrakte esančių antioksidantų greitam identifikavimui. Po gradientinio skirstymo0,8 ml/min. eliuentų tėkmė buvo padalyta į dvi dalis. Viena dalis (0,16 ml/min.)nukreipta į reaktorių DPPH radikalų surišimo gebai įvertinti, kita (0,64 ml/min.) – įmasių detektorių antioksidanto struktūrai nustatyti. DPPH tirpalo tėkmės greitis buvo0,1 ml/min., reaktoriui panaudota 100 μl 0,33 mm vidinio skersmens politetrafluoretileno(TFE, angl. teflon) reakcijos kilpa. Nors autoriai teigia, kad sistema lemia minimalųsmailės išsiplėtimą, tačiau pateiktose MS ir DPPH chromatogramose matyti šiek tiekprasiplėtusios analičių smailės. Šis trūkumas tikriausiai susijęs su santykinai dideliureakcijos kilpos vidiniu skersmeniu esant mažam tėkmės greičiui.Pukalskas ir kt. (2005) išvystė sudėtingą ESC-RSD-DMD-KFE-BMR sistemąantioksidantams tiesiogiai identifikuoti kompleksiniuose mišiniuose. Eliuentas suatskirtomis analitėmis po diodų matricos detektoriaus (DMD) dalijamas į dvi skirtingastėkmes, kurių viena patenka į radikalų surišimo detekcijos (RSD) sistemą, kita – įkietafazės ekstrakcijos (KFE) ir branduolių magnetinio rezonanso (BMR) detekcijossistemą. RSD sistemoje eliuentas sumaišomas su santykinai koncentruotu 0,1 mMmetanoliniu DPPH ir amonio acetato buferio tirpalu. Metodas buvo pritaikytas komerciniamerozmarinų ekstrakte esančių laisvuosius radikalus surišančių junginių tyrimamsatlikti. Autoriai kaip pagrindinę problemą įvardija menką BMR detektoriaus jautrumą.Exarchou ir kt. (2006) patobulino ESC-RSD-DMD-KFE-BMR sistemą21