sodininkystė ir daržininkystė 31(3–4)

standartiniams antioksidantams tirti. Autoriai išvadose teigia, kad ESC-ABTS pokolonėlinismetodas yra selektyvus, santykinai paprastas, nebrangus ir kur kas jautresnisnei ESC-DPPH metodas.Miliauskas ir kt. (2004) pritaikė ESC-ABTS pokolonėlinį metodą Potentillafruticosa ekstrakto antiradikaliniam aktyvumui tirti. Vėliau ta pati mokslininkų grupėpanaudojo sudėtingą ESC-DMD-KFE-BMR sistemą kartu su ESC-ABTS laisvuosiusradikalus surišantiems junginiams tiesiogiai identifikuoti Rhaponticum carthamoidesekstraktuose.Atskiros mokslininkų grupės nežymiai modifikuodavo ESC-ABTS pokolonėlinįmetodą ir pritaikydavo įvairių augalinių žaliavų antiradikalinio aktyvumo tyrimamsatlikti (Beekwilder ir kt., 2005; Cano ir kt., 2002; Stalmach ir kt., 2006; Stewart ir kt.,2005). Dažniausiai optimizuodavo ABTS •+ tirpalo koncentraciją, reakcijos terpės pH,reakcijos laiką ir reakcijos kilpos parametrus, siekdami padidinti metodo jautrumą.Stewart ir kt. (2005) ESC-ABTS pokolonėliniu metodu ištyrė juodosios ir žaliosiosarbatos bandinius. Gautus duomenis susiejo su ESC-MS sistemoje gautais rezultatais.Pagal sulaikymo laikus ir masių spektrus identifikavo naujus antiradikaliniu aktyvumupasižyminčius junginius – chino rūgšties darinius su kafeoil ir feruloil pakaitais. Li ir kt.(2007) tiesiogiai sujungė ESC-ABTS pokolonėlinį metodą su masių spektrometrija.Eliuentas po diodų matricos detektoriaus dalijamas į dvi skirtingas tėkmes, kurių vienapatenka į pokolonėlinę ABTS sistemą, kita – į masių spektrometrą.FRAP metodu įvertinamas antioksidantų gebėjimas rūgštinėje terpėje redukuotigeležies 2,4,6-tripyridyl-s-triazino [Fe(III)-(TPTZ) 2] 3+ kompleksą į intensyviai mėlynosspalvos [Fe(II)-(TPTZ) 2] 2+ kompleksą (Benzie, Strain, 1996, 1999).S p e k t r o f o t o m e t r i n i s m e t o d a s. Su elektronų perdavimo reakcijomissusijęs tirpalo absorbcijos padidėjimas išmatuojamas esant 593 nm bangos ilgiui.Gautos reikšmės palyginamos su etaloniniu dvivalentės geležies jonų tirpalu arbastandartinių antioksidantų (troloksas, askorbo rūgštis) tirpalais ir apskaičiuojamosFRAP arba TEAC, VCEAC reikšmės. FRAP metodas mažai skiriasi nuo ABTS radikalo-katijonosurišimo metodo, išskyrus tai, kad reakcija tarp antioksidanto ir ABTS •+dažniausiai vyksta neutralioje (pH 7,4) terpėje, o FRAP metodui būtinos rūgštinės(pH 3,6) sąlygos, kad nesusidarytų [Fe(III)-(TPTZ) 2] 3+ komplekso nuosėdos (Huangir kt., 2005; Karadag ir kt., 2009). Trivalentės geležies (Fe(III)) druskos redokso potencialas(0,70 V) panašus į ABTS •+ redokso potencialą (0,68 V) (Huang ir kt., 2005).Dvivalentė geležis (Fe(II)) yra gerai žinomas prooksidantas. Ji gali reaguoti suH 2O 2ir produkuoti OH • – žalingiausius laisvuosius radikalus in vivo. FRAP metodutiriamų junginių gebėjimas redukuoti Fe(III) į Fe(II) prilyginamas antioksidantiniamaktyvumui. Žinomi antioksidantai, tokie kaip askorbo rūgštis ar šlapimo rūgštis, galiredukuoti ir ROS/RNS, ir Fe(III), todėl jų gebėjimas redukuoti Fe(III) didina reaktyviųdeguonies ir azoto rūšių neutralizavimo tikimybę. Tačiau ne visi junginiai, galintysatiduoti elektronus trivalentės geležies jonams, yra antioksidantai (Prior ir kt., 2005).Šis FRAP metodo trūkumas susijęs su redokso potencialu. Junginys (net neturintisantioksidantinių savybių), turintis mažesnį redokso potencialą nei 0,70 V, teoriškai galiredukuoti Fe(III) jonus ir nulemti klaidingai didesnius FRAP rezultatus (Nilsson ir kt.,2005). Be to, antioksidantai, kurie efektyviai neutralizuoja prooksidantus, gali visaineredukuoti Fe(III). Pavyzdžiui, vienas svarbiausių antioksidantų in vivo – glutationas,24