Newslab 145

De acordo com Agência Nacional de
Vigilância Sanitária, a maior incidência de
falsificação de medicamentos recai sobre
os inibidores da PDE-5. Sendo verificadas
pela identificação das substâncias em
formas farmacêuticas autênticas ou falsificadas
por diferentes técnicas analíticas,
como espectroscopia Raman, espectroscopia
de ressonância magnética nuclear
(RMN1H, 13C e 15N), difratometria de
raios-X, espectrometria no infravermelho
próximo e espectrofotometria após
complexação. Na literatura, para a determinação
quantitativa da Tadalafila é
empregado a cromatografia líquida de
alta eficiência (CLAE) (ORTIZ et al., 2010;
ZOU et al., 2006; SINGH et al., 2009; ME-
LNIKOV et al., 2003; MOFFAT et al., 2004;
TREFI et al., 2008).
A quantificação de um fármaco em
uma formulação e na sua forma isolada
representa um aspecto fundamental da
garantia da qualidade de medicamentos.
Para garantir a confiabilidade e a interpretação
de um método analítico este deve
sofrer uma avaliação denominada validação.
A validação de um método analítico
é uma ferramenta capaz de demonstrar,
por meio de estudos experimentais, que
o método é apropriado para a finalidade
a que se destina, a fim de garantir a
confiabilidade dos resultados obtidos
sendo um dos principais instrumentos
dentro da garantia de qualidade de uma
formulação farmacêutica. Preconizam-se
estudos de especificidade, linearidade,
exatidão, precisão, sensibilidade, limites
de detecção e quantificação e robustez,
também calibração dos equipamentos
e materiais e qualificação dos analistas
(ANVISA, 2003; ICH, 2005a; ICH, 2005b;
ICH, 2005c).
A técnica espectrofotométrica na região
do ultravioleta (UV), é amplamente usada
no controle de qualidade de fármacos, pois
é rápida, possui baixo custo operacional e
elevada confiabilidade de resultados (AL-
VES et al., 2010; GÖRÖG, 2004).
O presente trabalho teve por objetivo
determinar e validar a espectrofotometria
por UV para a quantificação da Tadalafila
em comprimidos avaliando os parâmetros
de linearidade, limites de quantificação e
de detecção, precisão, exatidão e robustez
e estabilidade da solução.
PARTE EXPERIMENTAL
Materiais
Reagentes e amostras
O padrão de Tadalafila foi adquirido
em farmácias de manipulação de Cascavel
– PR, sendo sua autenticidade e
demais parâmetros de qualidade avaliados
pela empresa Opção Fênix. Os comprimidos
de Tadalafila (Cialis® ) foram
adquiridos em farmácia de dispensação
no município de Cascavel-PR. Todas
as análises foram realizadas utilizando
como solvente Álcool metílico PA (Anidrol,
Nuclear e Laborclin).
Preparo da solução padrão
A solução padrão em concentração de
1000 μg mL-1de Tadalafila foi preparada
solubilizando 50 mg de Tadalafila em
álcool metílico e completando o volume
em balão volumétrico de 50 mL.
Solução de 100 μg mL-1 produzida pela
transferência de 1 mL de uma solução
de 1000 μg mL-1 para um balão de 10
mL, completando o volume do recipiente
com Metanol PA. Soluções mantidas à
temperatura ambiente e ao abrigo luz.
Preparo das amostras
Um comprimido contendo 20 mg de
Tadalafila foi pesado e triturado a pó fino,
conforme preconizado na Farmacopéia
Brasileira (2002). Em seguida, quantidade
equivalente a 10 mg do fármaco foi
pesada e solubilizada em metanol, para
obter a concentração final de 10 μg mL-1.
A solução do comprimido foi filtrada em
filtro quantitativo. Esta solução foi mantida
à temperatura ambiente e protegida
da luz.
Equipamentos
Espectofotômetro UV/VIS Spectrometer
T70+ PG Instruments LTD.
Estabilidade da
solução
Prepararam-se duas soluções de Tadalafila
10 μg mL-1, umas delas mantida
em temperatura controlada de 22ºC e
outra permanecendo em temperatura
ambiente. As amostras foram analisadas
em triplicata nos tempos de 0, 24 e
48horas.
Validação do método
analítico por
espectrofotometria na
região do UV
O método foi validado conforme o
preconizado na Resolução RE nº 899,
de 29/5/2003, e com as recomendações
da ICH (The International Conference
on Harmonisation of Technical Requirements
for Registration of Pharmaceuticals
for Human Use) (ICH, 2005a; ICH,
2005b). Os parâmetros avaliados foram
especificidade, linearidade e faixa, limites
de quantificação (LQ) e detecção (LD),
precisão, exatidão e robustez.
Linearidade e faixa
A linearidade foi determinada através
da construção de três curvas de
calibração na faixa de 1-25 μg mL-1.
Foram preparadas soluções em cinco
concentrações diferentes (1; 2,5; 5, 10 e
25 μg mL-1), a partir da solução padrão
de Tadalafila 100μg mL-1. A leitura das
absorbâncias realizada em triplicata em
comprimento de onda de 284nm e a linearidade
estimada por regressão linear
(ANVISA, 2003; ICH, 2005a; ICH, 2005b;
BORBA et al., 2013).
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