fundamentos y tecnicas de analisis de alimentos - DePa - UNAM

Fundamentos y Técnicas de Análisis de Alimentos 37
Indice de refracción (Aurand et al, 1987)
Se emplea un refractómetro, se realiza la prueba de 20-25°C para aceites y a 40°C para
grasas. Se puede mantener la temperatura empleando un baño de agua a temperatura
constante para que circule a través de los prismas.
Colocar la muestra en los prismas del refractómetro de campo, adecuadamente calibrado.
Cierre la tapa, suavemente, la muestra debe cubrir completamente la superficie del prisma.
Mirar la escala a través de la “mirilla”. Leer en la escala, en la intersección de los campos. En
caso de que la separación de los campos no sea clara, ajustar moviendo la base del objetivo.
Eliminar la muestra del prisma, utilizando un papel suave.
Vitamina A. Método de Carr-Price (Aurand et al, 1987)
Preparación de la muestra:
Saponificación. Se agregan 30 mL de etanol a 100 mg de muestra en un matraz de 250
mL. Posteriormente se añade 10 mL de hidróxido de potasio (50g/50mL agua) y se somete a
reflujo durante 30 min.
Extracción. Una vez saponificada la muestra, se deja enfriar a temperatura ambiente.
Se extrae la fracción insaponificable en un embudo de separación con 4 o 5 lavados de 30 mL
de éter etílico. Se juntan los extractos etéreos y se lavan con agua destilada hasta que los
lavados no den reacción con la fenolftaleína. El extracto etéreo se trata con sulfato de sodio
anhidro para eliminar el agua.
Evaporación del solvente. El extracto etéreo se evapora en el rotavapor.
Determinación:
Las lecturas de deben realizar 10 s después de haber agregado el reactivo de Carr-Price
(tricloruro de antimonio al 20% en diclorometano o cloroformo).
En un tubo se colocan 0.5mL de solución problema y se adicionan 5 mL del reactivo de Carr
Price. Se lee en el espectofotómetro a 620nm
Se prepara una curva estándar de 7-30UI/mL de la misma forma que la muestra.
Colesterol (Kirk et al, 1996)
Pesar 100 mg. de material lipídico y disolver en un volumen conocido de diclorometano.
Colocar 0.2 mL en un tubo de ensaye. Adicionar con precaución 4 mL de anhídrido acético
(6.33 M en ác. acético). Mezclar y dejar 10 min en reposo. Adicionar 1 mL de H2SO4 conc. y
agitar con precaución. Dejar 30 min a temperatura ambiente. Leer contra un blanco de
reactivos a 620 nm
Preparar una curva patrón con colesterol en un intervalo de concentración de 0.2 -2 mg/mL.
Llevar a cabo la reacción, como se menciono anteriormente y leer a 620 nm.
LABORATORIO DE ALIMENTOS I
FACULTAD DE QUIMICA, UNAM