fundamentos y tecnicas de analisis de alimentos - DePa - UNAM
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Fundamentos y Técnicas <strong>de</strong> Análisis <strong>de</strong> Alimentos 39<br />
Colocar el equivalente a 0.001-0.1 g <strong>de</strong> lípidos en un tubo <strong>de</strong> vidrio y llevarlo a 10 mL con el<br />
mismo disolvente. Adicionar 0.05 mL <strong>de</strong> una solución <strong>de</strong> tiocianato <strong>de</strong> amonio (30%), mezclar y<br />
medir la Absorbancia a 500 nm frente a un blanco <strong>de</strong> solventes (Eo).<br />
Adicionar 0.05 mL <strong>de</strong> solución <strong>de</strong> cloruro ferroso (FeCl2), al 0.35% con 2% <strong>de</strong> HCl 10M, mezclar<br />
y tomar el tiempo. Después <strong>de</strong> exactamente 5 min medir la absorbancia a 500 nm (E2).<br />
Simultáneamente hacer una <strong>de</strong>terminación <strong>de</strong>l blanco (E1).<br />
Preparar una curva <strong>de</strong> calibración con cloruro férrico (FeCl3) en concentraciones que<br />
contengan entre 5 y 50 µg <strong>de</strong> Fe/10 mL. Es importante mencionar que el FeCl3 <strong>de</strong>berá<br />
encontrarse disuelto en la mezcla <strong>de</strong> disolventes. La curva se prepara mezclando 10 mL <strong>de</strong><br />
cada dilución <strong>de</strong> FeCl3 con 0.05 mL <strong>de</strong> tiocianato <strong>de</strong> amonio y 0.05 mL <strong>de</strong> HCl 0.2M, leyendo a<br />
la misma longitud <strong>de</strong> onda.<br />
El índice <strong>de</strong> peróxidos (IP en mEq/Kg) se obtiene relacionando la cantidad <strong>de</strong> Fe, expresados<br />
comoµg/10 mL obtenidos en la reacción, con el peso <strong>de</strong> la muestra. La cantidad <strong>de</strong> Fe se<br />
obtiene a partir <strong>de</strong> la curva <strong>de</strong> calibración, utilizando la absorbancia obtenida, una vez<br />
corregida por los blancos [E2 - (E1 + Eo)].<br />
Índice <strong>de</strong> Kreis<br />
Disolver <strong>de</strong> 50 a 500 mg <strong>de</strong> grasa en 5 mL <strong>de</strong> diclorometano. Añadir 10 mL <strong>de</strong> una solución <strong>de</strong><br />
ácido tricloroacético al 30% en ácido acético glacial y 1 mL <strong>de</strong> floroglucinol al 1% en ácido<br />
acético. Agitar e incubar por 15 min, en un baño maría a 45°C, <strong>de</strong>jar enfriar y agregar 4 mL <strong>de</strong><br />
etanol. Medir la absorbancia <strong>de</strong> la muestra a 540 nm frente a un blanco <strong>de</strong> reactivos.<br />
El Índice <strong>de</strong> Kreis se calcula como Abs a 540 nm/g <strong>de</strong> grasa.<br />
LABORATORIO DE ALIMENTOS I<br />
FACULTAD DE QUIMICA, <strong>UNAM</strong>