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fundamentos y tecnicas de analisis de alimentos - DePa - UNAM

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Fundamentos y Técnicas <strong>de</strong> Análisis <strong>de</strong> Alimentos 49<br />

Por precipitación <strong>de</strong> complejos con yodo<br />

Se recomienda utilizar el extracto obtenido por solubilización con ácido perclórico.<br />

Transferir una porción <strong>de</strong>l extracto <strong>de</strong> ác. perclórico (1 a 10 mL) a un tubo calibrado a 10, 15<br />

y 20 mL, y diluir a 10 mL.<br />

Adicionar 2 mL <strong>de</strong> una solución <strong>de</strong> cloruro <strong>de</strong> sodio 20% (p/v), seguida <strong>de</strong> 2 mL <strong>de</strong> solución <strong>de</strong><br />

I/KI (7.5 g <strong>de</strong> I2 y 7.5 g <strong>de</strong> KI en 250 mL <strong>de</strong> agua). Dejar reposar 20 min.<br />

Centrifugar y eliminar el sobrenadante. Resuspen<strong>de</strong>r el precipitado en 5 mL <strong>de</strong> solución <strong>de</strong><br />

cloruro <strong>de</strong> sodio alcohólica (350 mL <strong>de</strong> alcohol con 50 mL <strong>de</strong> solución <strong>de</strong> NaCl 20% llevados a<br />

500 mL con agua) y lavar por centrifugación.<br />

El almidón se cuantifica gravimétricamente o <strong>de</strong>scomponiendo el complejo en medio alcalino<br />

y cuantificando con un método como el <strong>de</strong> antrona o fenol-sulfúrico. Así mismo el almidón<br />

liberado pue<strong>de</strong> ser sometido a hidrólisis enzimática con amiloglucosidasa y cuantificar la<br />

glucosa liberada.<br />

Por reacción colorida con yodo<br />

Este procedimiento únicamente pue<strong>de</strong> ser utilizado cuando el almidón se encuentra<br />

completamente disuelto (gelatinizado).<br />

Colocar 2 mL <strong>de</strong> la solución <strong>de</strong> almidón en un tubo <strong>de</strong> ensayo y adicionar 3mL <strong>de</strong> una solución<br />

<strong>de</strong> I/KI preparada diluyendo 2 mL <strong>de</strong> sol <strong>de</strong> yodo (1.269 g I2 con 1.8 g <strong>de</strong> KI en 100 mL) a 100<br />

mL con agua.<br />

Medir la intensidad <strong>de</strong>l color azul producido en un espectrofotómetro a 600 nm, frente a un<br />

blanco <strong>de</strong> reactivos.<br />

Calcular la cantidad <strong>de</strong> almidón presente en la muestra a partir <strong>de</strong> una curva patrón<br />

preparada en el intervalo <strong>de</strong> 0.02-0.2 mg <strong>de</strong> almidón soluble/mL, tratada <strong>de</strong> la misma manera<br />

que el problema.<br />

Los resultados <strong>de</strong> esta <strong>de</strong>terminación son relativos, ya que no todas las fuentes <strong>de</strong> almidón<br />

forman el mismo complejo colorido con yodo.<br />

ANÁLISIS DE PECTINAS (Nielsen, 1998)<br />

Colocar 3 g <strong>de</strong> muestra <strong>de</strong>sengrasada, <strong>de</strong> preferencia con etanol/benceno, en un<br />

embudo con filtro <strong>de</strong> vidrio poroso y extraer con una solución al 0.5% (p/v) <strong>de</strong> oxalato <strong>de</strong><br />

amonio durante 2 h. a 85°C. Repetir la extracción 4 veces.<br />

Combinar los filtrados y acidificar ligeramente con HCl 1M. Adicionar 4 volúmenes <strong>de</strong> etanol<br />

con agitación y <strong>de</strong>jar sedimentar el precipitado. Decantar el sobrenadante sobre un embudo<br />

con filtro <strong>de</strong> vidrio poroso previamente colocado a peso constante. Transfiera el precipitado al<br />

LABORATORIO DE ALIMENTOS I<br />

FACULTAD DE QUIMICA, <strong>UNAM</strong>

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