fundamentos y tecnicas de analisis de alimentos - DePa - UNAM

Fundamentos y Técnicas de Análisis de Alimentos 45
CARBOHIDRATOS TOTALES
LABORATORIO DE ALIMENTOS I
FACULTAD DE QUIMICA, UNAM
ANALISIS DE CARBOHIDRATOS
Método del fenol-sulfúrico (Dubois et al, 1956)
Preparar una solución o suspensión de la muestra en agua, procurando que los carbohidratos
se encuentren en el intervalo de sensibilidad del método (10-100µg/mL).
En tubos de ensaye perfectamente etiquetados, colocar 1 mL de la solución o suspensión
acuosa de la muestra.
Para cada tubo adicionar 0.6 mL de una solución acuosa de fenol al 5%. Mezclando
perfectamente, adicionar cuidadosamente 3.6 mL de ácido sulfúrico concentrado,
homogeneizar.
NOTA. Realizar todo el procedimiento para un tubo antes de seguir con el siguiente.
Dejar enfriar la mezcla a temperatura ambiente (aproximadamente 30 min.) y determinar la
intensidad del color naranja obtenido en un colorímetro a 480 nm, frente a un blanco
preparado de la misma manera utilizando agua.
Calcular la cantidad de carbohidratos presentes en la muestra a partir de una curva patrón
preparada con el carbohidrato de interés en el intervalo del método (10-100µg de
glucosa/mL), tratada de la misma manera que el problema.
ANÁLISIS DE POLISACARIDOS
Determinación de fibra dietética (AOAC 45.4.07)
Correr un blanco a lo largo de toda la determinación.
1. Pesar por 1g de muestra (exactitud de 0.1g) en matraces de 500 mL. El peso de las
muestras no debe diferir en más de 20 mg.
2. Adicionar 50 mL de buffer de fosfato0.08M pH 6 0
3. Medir pH y ajustar a pH 6± 0.2 si es necesario
4. Adicionar 0.1 mL de la solución de amilasa
5. Cubrir el matraz con papel aluminio
6. Colocar el matraz en un baño a ebullición durante 15 min.
7. Agitar suavemente cada 5 minutos