Medicina.forense.Grandini.3ª.Ed

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Medicina forense
Columnas y tipos
de fases estacionarias
Las columnas empacadas consisten en unos tubos de vidrio o metal (inerte de ser posible
como el acero inoxidable, níquel, cobre o aluminio) de 2 a 3 m de longitud y un diámetro
interno de unos cuantos milímetros. El interior se rellena con un material sólido, finamente
dividido para tener una máxima superficie de interacción y recubierto con una capa de
espesores entre 50 nm y 1 μm. Para que puedan introducirse en el horno se enrollan
de manera conveniente.
El material de relleno consiste en pequeñas partículas y debe ser inerte a altas temperaturas
(alrededor de 400°C). El material es la tierra de diatomeas. También hay columnas
capilares que requieren menor cantidad de analito y un detector más sensible.
Es importante elegir una fase estacionaria adecuada a la muestra de estudio; se mencionan
algunas de ellas:
• Fase no polar de uso general para hidrocarburos, aromáticos, polinucleares, drogas,
esteroides (polidimetilsiloxano).
• Fase polar como glicoles, alcoholes, éteres, aceites esenciales (polietilenglicol).
La cromatografía de gases tiene dos importantes campos de aplicación, ya que cuenta con
capacidad para separar mezclas orgánicas complejas y como método cuantitativo de los
componentes de la muestra.
Para el análisis cualitativo se suele usar el tiempo de retención, que es único para cada
compuesto, utilizando los mismos parámetros del equipo (las mismas condiciones de gas,
temperatura, entre otros).
Se cuenta con diferentes aditamentos o equipos para los cromatógrafos; por ejemplo
el Head-space; éste es un aditamento que proporciona diferentes niveles de temperatura debido
a las resistencias que contiene el equipo, lo que suministra la temperatura requerida
para cada análisis y volatiliza los compuestos; además, hace posible introducir de forma
automática compuestos volátiles, a partir de casi cualquier matriz, directamente al cromatógrafo
de gases.
Esta técnica tiene muchas aplicaciones en el laboratorio; por ejemplo, contaminación
de alimentos, fragancias, y determinaciones de grado de alcohol, tanto en muestras biológicas
como en bebidas.
Cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC, High Perfomance Liquid Chromatography).
Los primeros equipos de cromatografía de gases aparecieron en el mercado
a mediados del siglo XX. A su vez, la cromatografía líquida de alta resolución comenzó a
desarrollarse en el decenio de 1960.
En toda cromatografía existen dos fases, una fija que suele llamarse fase estacionaria
y la fase móvil; en este caso es un líquido o mezcla de varios líquidos. Las sustancias que
permanecen más tiempo libre en la fase móvil avanzan con mayor rapidez con el fluir de
ésta y las que quedan más unidas a la fase estacionaria avanzan menos y, por tanto, tardan
más en salir.
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