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Analyse avec le logiciel imagej d'un lot d'images en microscopie par ...

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in2p3-00530281, version 1 - 28 Oct 2010<br />

Annexe E<br />

Listing de la Macro d’analyse<br />

« Macro_GM_CCQ_v9 »<br />

Cette macro simplifie la tache de comptage des foci <strong>par</strong> noyau et de mesure des caractéristiques<br />

des foci dans des cellu<strong>le</strong>s marquées au DAPI et au H2AX <strong>par</strong> l'analyse des images de cellu<strong>le</strong>s de<br />

fibroblaste irradiées à l'ESRF<br />

Les images des masques, <strong>le</strong>s ROI et des foci repérés sont stockés dans une pi<strong>le</strong>. Une boite de<br />

dialogue demande un dossier cont<strong>en</strong>ant deux sous-dossiers obligatoirem<strong>en</strong>t nommés DAPI et H2AX<br />

pour automatiser <strong>le</strong>s traitem<strong>en</strong>ts et répéter <strong>le</strong>s mesures.<br />

Les images Tiff, (DAPI et H2AX), à analyser doiv<strong>en</strong>t être triées dans <strong>le</strong> même ordre pour<br />

être ap<strong>par</strong>iées correctem<strong>en</strong>t lors de l'analyse,<br />

On exécute la macro <strong>par</strong> la touche [g] ou dans "Plugins>Macros>Run",<br />

El<strong>le</strong> bouc<strong>le</strong> sur l'<strong>en</strong>semb<strong>le</strong> des images des deux répertoires,<br />

La macro propose automatiquem<strong>en</strong>t une sé<strong>le</strong>ction pour chaque noyau analysé: l’opérateur<br />

doit accepter ou rejeter la sé<strong>le</strong>ction. ==> 'Yes' ajoute la sé<strong>le</strong>ction au « ROI manager », 'No'<br />

la supprime.<br />

Les sé<strong>le</strong>ctions sont r<strong>en</strong>ommées (préfixe "Cell_"),<br />

En fin d'analyse, <strong>le</strong>s résultats sont sauvés dans <strong>le</strong> répertoire <strong>par</strong><strong>en</strong>t:<br />

- Les sé<strong>le</strong>ctions (ROI) sont sauvegardées dans <strong>le</strong>s fichiers de type « zip » (Qu’el<strong>le</strong>s<br />

soi<strong>en</strong>t multip<strong>le</strong>s ou unique).<br />

- Les résultats des analyses des foci <strong>par</strong> noyau (mesures de surface, périmètre,<br />

position…) sont placés dans <strong>le</strong>s fichiers de type « xls »<br />

- Les pi<strong>le</strong>s <strong>d'images</strong> mémoris<strong>en</strong>t <strong>le</strong>s masques ayant servis à la quantification.<br />

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