Manuscrit_these_Mathieu _Cladiere_VF - LEESU

Chapitre II : Matériels et méthodesTableau II-17 : Rendements de récupération lors de la purification sur OASIS ® HLB avec matrice (n=5)ComposésRendementsrécupération (%)Ecartstypes (%)Réduction signal étalons injection (%)extrait non purifié → extrait purifié * → étalons purifiésBPA 108 14 57 % → 19 % → 24 %4-NP 80 20 80 % → 28 % → 28 %NP 1EO 72 18 56 % → 28 % → 01 %NP 2EO 90 15 56 % → 28 % → 01 %NP 1EC 91 18 55 % → 22 % → 22 %4-t-OP 82 17 80 % → 28 % → 28 %OP 1EO 67 12 56 % → 28 % → 01 %OP 2EO 73 9 56 % → 28 % → 01 %* : Les extraits purifiés ont été réalisés à partir du protocole d’extraction optimisé dans cette étudeLes résultats du Tableau II-17 révèlent que les rendements de récupération obtenuspour la cartouche OASIS ® HLB avec matrice sont similaires à ceux retrouvés précédemmentsans matrice. Ainsi la présence de matrice, lors de la purification, ne perturbe pas lesrendements de récupération qui sont globalement supérieurs à 67 %. Dans le cas du 4-t-OP,alors que les rendements sans matrice étaient de 50 ± 14 % ceux retrouvés avec matrice sontnettement améliorés (82 ± 17 %). Cette amélioration de récupération est difficilementexplicable, mais un phénomène similaire a été mentionné par Arditsoglou et Voutsa (2008)pour la même cartouche. Enfin, les tests réalisés avec matrice ont permis de mettre enévidence que l’étape de purification sur cartouche SPE OASIS ® HLB diminuait sensiblementles effets de matrice lors de l’analyse en UPLC-MS-MS. L’amélioration des effets de matricea été mise en évidence à partir des réductions de signal des étalons internes d’injection dedeux réplicats non purifiés comparés à celles des réplicats purifiés et des réplicats réaliséssans matrice (Tableau II-17).b) Optimisation de l’extraction par micro-ondeAvant l’étape d’optimisation, les composés alkylphénoliques et le BPA étaient extraitspar micro-onde (Multiwave 3000, Antonn Paar) à l’aide de 20 mL d’un mélange MeOH/DCM(10/90 v/v) (Gilbert 2011). Les composés sont extraits à 100°C sous une pression de 7 barsdurant un cycle de 30 minutes (15 minutes de chauffe, 15 minutes de refroidissement).L’optimisation de l’étape de purification a permis de mettre en évidence que l’extraction parmicro-onde, alors en place, ne permettait pas d’extraire totalement le NP 1 EC (18 ± 6 %). Enconséquence, l’étape d’extraction a également été optimisée. Les paramètres d’extraction parmicro-onde comme la température, la pression et le temps de cycle, déjà validés, n’ont pas étémodifiés. Seules les proportions du mélange MeOH/DCM ont été testées. Durant ce test, enplus du mélange initial, trois mélanges MeOH/DCM respectivement de 60/40 (v/v), 75/25(v/v) et 90/10 (v/v) ont été testés.Les déterminations des rendements d’extraction par micro-onde ont été menées àpartir de 200 mg de particules sédimentables collectées par un piège à sédiment au niveau dupont d’Austerlitz à Paris. Les rendements sont calculés à partir d’échantillons non dopés etd’échantillons dopés (100 µL de solution d’étalons de référence) extraits durant le mêmecycle. Les dopages des particules étaient effectués la veille de l’extraction permettant ainsiaux 100 µL de solution de dopage de s’adsorber sur les particules (les bombes étaient closesla nuit pour éviter l’évaporation de la solution de dopage). Pour chaque mélange de solvants,cinq réplicats ont été analysés (Figure II-11).101