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com as técnicas de FISH, CMA, DAPI - IAC

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Mediante a técnica <strong>de</strong> bandamento foi possível estabelecer os pares cromossômicos <strong>de</strong><br />

tod<strong>as</strong> <strong>as</strong> espécies e subespécies estudad<strong>as</strong>. A partir dos padrões <strong>de</strong> banda-C, os autores<br />

verificaram similarida<strong>de</strong> cariotípica entre <strong>as</strong> espécies estudad<strong>as</strong>; para <strong>as</strong> subespécies<br />

foram verificad<strong>as</strong> diferenç<strong>as</strong> no padrão <strong>de</strong> banda-C.<br />

Para discriminar espécies <strong>de</strong> Alstroemeria envolvid<strong>as</strong> na formação <strong>de</strong> híbridos<br />

interespecíficos, KUIPERS et al. (1997) usaram uma <strong>com</strong>binação da técnica <strong>de</strong><br />

hibridação in situ genômico (GISH) <strong>com</strong> slot-blot e hibridação southern blot. Com a<br />

técnica <strong>de</strong> GISH foi possível discriminar claramente <strong>as</strong> espécies parentais envolvid<strong>as</strong> na<br />

formação dos híbridos interespecíficos entre <strong>as</strong> espécies chilen<strong>as</strong> e entre espécies<br />

chilen<strong>as</strong> e br<strong>as</strong>ileir<strong>as</strong>. Tod<strong>as</strong> <strong>as</strong> espécies parentais envolvid<strong>as</strong> na formação dos híbridos<br />

e os próprios híbridos eram todos diplói<strong>de</strong>s <strong>com</strong> 2 n = 2x = 16 cromossomos.<br />

Estudos <strong>de</strong> <strong>com</strong>portamento <strong>de</strong> cromossomos meióticos e também <strong>de</strong><br />

bandamento-C foram realizados por ISHIKAWA & ISHIZAKA (2002). Estes autores<br />

estudaram espécies diplói<strong>de</strong>s <strong>de</strong> A. ligtu e A. pelegrina e seus híbridos interespecíficos<br />

triplói<strong>de</strong>s e tetraplói<strong>de</strong>s (2n = 16, 3n = 24, 4n = 32).<br />

2.5 Coloração <strong>com</strong> Giemsa<br />

O corante Giemsa é um corante que marca os cromossomos uniformemente<br />

<strong>as</strong>sim <strong>com</strong>o a técnica do corante carmim acético. Ess<strong>as</strong> técnic<strong>as</strong> consi<strong>de</strong>rad<strong>as</strong><br />

convencionais são limitantes qualitativamente, e muit<strong>as</strong> vezes não proporcionam uma<br />

diferenciação longitudinal dos cromossomos. Com o emprego <strong>de</strong>st<strong>as</strong> técnic<strong>as</strong>, é<br />

possível <strong>de</strong>terminar: o número cromossômico d<strong>as</strong> espécies, <strong>as</strong> medid<strong>as</strong> dos<br />

cromossomos, o <strong>com</strong>primento total da cromatina, o índice <strong>de</strong> <strong>as</strong>simetria, a visualização<br />

da região centromérica, da constrição secundária e do segmento satélite a ela <strong>as</strong>sociada,<br />

quando presente, a cl<strong>as</strong>sificação dos cromossomos em categori<strong>as</strong>, que vão <strong>de</strong><br />

metacêntrico a telocêntrico e o estabelecimento da fórmula cariotípica.<br />

A obtenção <strong>de</strong> vários dados cromossômicos através da utilização d<strong>as</strong> técnic<strong>as</strong><br />

convencionais usad<strong>as</strong> por muitos autores, e em alguns c<strong>as</strong>os a apresentação do cariótipo<br />

simplesmente corado <strong>com</strong> corantes convencionais, é insuficiente para uma<br />

caracterização intraespecífica e/ou interespecífica <strong>de</strong> espécies, pelo fato <strong>de</strong>ssa<br />

metodologia não ser capaz <strong>de</strong> especificar característic<strong>as</strong> morfológic<strong>as</strong> <strong>de</strong>talhad<strong>as</strong>,<br />

muit<strong>as</strong> vezes necessári<strong>as</strong> para a i<strong>de</strong>ntificação individual dos cromossomos.<br />

Para citar alguns exemplos, temos primeiramente o trabalho realizado por<br />

SILVEIRA et al. (2006) que, utilizando a técnica <strong>de</strong> Giemsa, <strong>de</strong>terminaram o número<br />

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