com as técnicas de FISH, CMA, DAPI - IAC

18S-5.8S-26S e um de rDNA 5S. A coloração com prata revelou bandas coincidentes
com alguns dos sítios de rDNA.
As técnicas de coloração com os fluorocromos CMA e DAPI foram usadas por
KOEHLER et al. (2008) para rever a delimitação e propor uma classificação mais
estável para o gênero Christensonella (Orchidaceae). Os dados citogenéticos indicaram
o número de cromossomos variando de 2n = 36, 38 e 76. Embora estudos
complementares sejam ainda necessários para uma melhor compreensão do gênero
Christensonella, os padrões de bandas e a contagem cromossômica sugerem a
ocorrência de fusão cêntrica e/ou fissão, especialmente para C. ferdinandiana; os
resultados sugerem também que as espécies com número cromossômico igual a 2n = 36
evoluíram das espécies com número cromossômico igual a 2n = 38. Portanto, os
padrões de heterocromatina e outros dados cariotípicos, provaram ser de grande
importância para entender os padrões evolutivos dentro do gênero.
Em alguns dos estudos acima ficou claro que a utilização do bandamento com
fluorocromos é uma ferramenta importante para a diferenciação, caracterização e até
mesmo uma visualização dos processos evolutivos das espécies.
Para o gênero Alstroemeria não existem dados publicados sobre a caracterização
cromossômica através de bandamento com os fluorocromos CMA3 e DAPI. No presente
trabalho os resultados da aplicação das técnicas de bandamento com CMA e DAPI são
originais, e são aqui relatados pela primeira vez. Assim, apesar de BAEZA et al. (2006;
2007) terem usado fluorocromo DAPI para caracterizar os cromossomos das espécies
chilenas A. ligtu subsp. ligtu e A. ligtu subsp. samsii, A. aurea, A. hookeri e A presliana
não foram descritos padrões de bandas para as referidas espécies.
2.7 Hibridação in situ
A hibridação in situ (HIS) é uma técnica empregada para a visualização de
sequências definidas de ácidos nucléicos, DNA alvo (DNA ou RNA), em preparações
celulares, através da hibridação com sequências complementares conhecidas (DNA
sonda). O objetivo final da hibridação in situ, consiste basicamente na verificação se a
célula, tecido ou cromossomos possuem sequências de nucleotídeos do DNA utilizado
como sonda. Esse método foi descrito pela primeira vez por GALL & PARDUE (1969).
A técnica proporciona a interação entre conhecimento da biologia celular, citogenética
clássica e genética molecular.
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