com as técnicas de FISH, CMA, DAPI - IAC

carmim acético. PINTO-MAGLIO et al. (1995) usando igualmente corante
convencional, como o Giemsa, determinaram também o número cromossômico para
algumas espécies do gênero Alstroemeria. Estes autores verificaram que a coloração
com Giemsa era insuficiente para a diferenciação cromossômica intraespecífica e
interespecífica, visto as espécies do gênero não apresentarem diferenças no número de
cromossomos e nem diferenças morfológicas nos complementos cromossômicos. Com
base nesses resultados esses autores iniciaram experimentos inicialmente aplicando as
técnicas de bandamento com CMA e DAPI, com resultados positivos quanto à
diferenciação cromossômica das espécies analisadas (dados não publicados). O presente
trabalho deu continuidade a esta caracterização cariotípica de espécies de Alstroemeria
não somente através das técnicas de bandamento CMA/DAPI, mas ainda
complementada com o mapeamento das regiões organizadoras do nucléolo (NOR)
através do uso das técnicas de hibridação in situ fluorescente (FISH) e da impregnação
com prata (AgNOR), estando os resultados descritos nesta dissertação.
Embora as técnicas convencionais de coloração cromossômica, como a
coloração pelo corante Giemsa permita a diferenciação de espécies, muitas vezes são
necessárias técnicas de bandamento para uma caracterização mais detalhada dos
cromossomos individualmente. Técnicas de bandamento-C, bandamento-NOR,
bandamento com fluorocromos CMA e DAPI entre outras, permitem maior
detalhamento da estrutura e morfologia dos cromossomos individuais.
2.6 Bandamento com corantes fluorescentes - CMA3 e DAPI
A técnica de coloração utilizando corantes fluorescentes (fluorocromos) para
bandamento tem sido usada para a obtenção de padrões diferenciais característicos de
bandas fluorescentes nos cromossomos o que proporciona uma análise mais refinada
dos conjuntos cromossômicos. Os fluorocromos mais utilizados atualmente são o 4‟-6-
diamidino-2-fenilindol (DAPI) e a Cromomicina A3 (CMA3).
Segundo SCHWEIZER (1976), preparações cromossômicas com os
fluorocromos DAPI e CMA3 produzem padrões de bandamento de acordo com a
afinidade de bases do DNA. O corante fluorescente CMA3 é um fluorocromo que se liga
as regiões heterocromáticas ricas em bases nitrogenadas guanina e citosina (GC), já o
DAPI é um fluorocromo que se liga às regiões cromossômicas ricas em bases
nitrogenadas adenina e timina (AT). Estes fluorocromos podem ser associados a
antibióticos como a distamicina e actinomicina, respectivamente, para incrementar o
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