Interaktion von Masernviren mit Dendritischen Zellen - OPUS ...

Ergebnisse 100
Mockpräparation lag die Menge an CXCL-8 unterhalb der Detektionsgrenze. In
Überständen unbehandelter DC-Kulturen konnte zu beiden Zeitpunkten
geringfügig mehr CXCL-8 detektiert werden als im Zellkulturüberstand infizierter
DC-Kulturen.
CXCL-8 (pg/ml)
6000
5000
4000
3000
2000
1000
0
6 h p.i.
24 h p.i.
WTF ED LPS mock unbehandelt
Abbildung 4—13: Bestimmung der CXCL-8-Konzentration im Zellkulturüberstand MV-infizierter DC-
Kulturen. DC-Kulturen wurden mit MV infiziert (WTF und ED, moi 0,5). 6 bzw. 24 Stunden nach der
Infektion wurde der Überstand gesammelt und in einen CXCL-8-spezifischen ELISA eingesetzt. Als
Kontrollen wurden die Überstände von LPS-ausgereiften (100 ng/ml) oder mit einer Mockpräparation
behandelten sowie unbehandelten DC-Kulturen eingesetzt. Die Menge an gebildetem Protein wurde über
eine mitgeführte Standardreihe und die Veränderung der optischen Dichte bei einer Wellenlänge von
450 nm bestimmt. Zur Kontrolle der Infektion wurden die Zellen mit einem Antikörper gegen das MV-N-
Protein (F227) intrazellulär gefärbt (siehe Abbildung 4—11).
Die Ergebnisse der RT-PCR (Abbildung 4—10) bezüglich der induzierten CCL-
20 und CXCL-8 mRNA konnten durch die quantitative Bestimmung der
Proteinmenge im Zellkulturüberstand infizierter (WTF und ED), mit LPS
ausgereifter oder mit einer Mockpräparation behandelter DC-Kulturen bestätigt
werden.