Metabolomanalyse zur Untersuchung der Dynamik im ...

Abbildungsverzeichnis
vi
6.3 Vergleich zwischen 1 H–NMRund HPLC Daten mit realen Fermentationsproben
von E. coli 4pF20; Konzentrationen im Fermentationsverlauf (links)
mitPhasendiagrammen(rechts)......................... 65
6.4 Abnehmende LC–MS Peakflächen der Mehrfachinjektion mit Volumenfluss
von 500 µL min −1 indieESI–Quelle ...................... 68
6.5 Konstante LC–MS Peakflächen der Mehrfachinjektion nach Einbau des
Flussteilers mit einem Volumenfluss von 100 µL min −1 in die ESI–Quelle . . 69
6.6 Phosphatabspaltung von Zuckerphosphat-Molekülionen am Beispiel des G6P 71
6.7 Peakflächen der Kontrollanalyten G6P/F6P, 6PG und FBP der Quality Control(QC)–Probeneiner5–tägigenSequenzaus111Proben..........
75
6.8 Beispiele für Kalibrationsgeraden der StdAddM; Geradengleichungen durch
lineare Regression bestimmt (Probe Nr. 0 ist die Ursprungsprobe, Proben
1–5wurdensukzessivesteigendeMengenanStandardzugesetzt) ...... 76
6.9 Kalibrationsgerade StdAddM G6P/F6P, Funktion durch lineare Regression
bestimmt. (Probe Nr. 0 ist die Ursprungsprobe, Proben 1–5 wurden in
Schritten von 30 µM sukzessivStandardzugesetzt) .............. 76
6.10 Retrosynthetischer Zugang zu Metaboliten der Aromatenbiosynthese mit
gentechnisch geblockten E. coli Stämmen als Syntheseroute und Glukose
als universellem Synthesebaustein . . ...................... 79
6.11 Fermentationsverlauf für E. coli DHS Produzent, Zeitabschnitt 15–24 h ohne
Probenahme,LinienDarstellunginterpoliert.................. 80
6.12 Fermentationsverlauf für E. coli S3PProduzent................ 82
6.13 Fermentationsverlauf für E. coli DAH(P)Produzent ............. 84
6.14 LC–MS Messung Fermentationsprobe E. coli DAH(P) Produzent (links),
Phosphatase behandelte Fermentationsprobe (rechts) ............. 85
6.15 1 H–NMRDaten der Fermentation mit E. coli 4pF20 (links), Nebenproduktachse
ist 2,5-fach überhöht dargestellt, L–Phe Biosynthese mit Genen bzw.
gentechnischen Veränderungen (rechts), limitierende Gene weiß auf schwarz
dargestellt..................................... 89
6.16 1 H–NMRDaten der Fermentation mit E. coli 4pF26 (links), Nebenproduktachse
ist 2,5-fach überhöht dargestellt, L–Phe Biosynthese mit Genen bzw.
gentechnischen Veränderungen (rechts), limitierende Gene weiß auf schwarz
abgebildet..................................... 89
6.17 1 H–NMRDaten der Fermentation mit E. coli 4pF69 (links), Nebenproduktachse
ist 2,5-fach überhöht dargestellt, L–Phe Biosynthese mit Genen bzw.
gentechnischen Veränderungen (rechts), limitierende Gene weiß auf schwarz
abgebildet..................................... 91
6.18 1 H–NMRDaten der Fermentation mit E. coli 4pF79 (links), Nebenproduktachse
ist 2,5-fach überhöht dargestellt, L–Phe Biosynthese mit Genen bzw.
gentechnischen Veränderungen (rechts), limitierende Gene weiß auf schwarz
abgebildet..................................... 91
6.19 1 H–NMRDaten der Fermentation mit E. coli 4pF81 (links), Nebenproduktachse
ist 2,5-fach überhöht dargestellt, L–Phe Biosynthese mit Genen bzw.
gentechnischen Veränderungen (rechts), limitierende Gene weiß auf schwarz
abgebildet..................................... 93
6.20 Integrale Kohlenstoff–Bilanz E. coli 4pF79................... 95