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Metabolomanalyse zur Untersuchung der Dynamik im ...

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Abbildungsverzeichnis<br />

6.21 Prinzipielle Ablaufskizze bei <strong>der</strong> Identifizierung unbekannter Metabolite in<br />

Fermentationsproben............................... 97<br />

6.22 UV–Daten <strong>der</strong> organischen Säure HPLC mit unbekanntem Peak bei 16,9 min 98<br />

6.23 UV–Daten <strong>der</strong> HPLC–MS Messung <strong>der</strong> Peak–Fraktion 16,9 min (Nucleodex–<br />

β–OHPhase) ................................... 98<br />

6.24 MS–Daten <strong>der</strong> HPLC–MS Messung <strong>der</strong> Peak–Fraktion 16,9 min (Nucleodex–<br />

β–OHPhase) ................................... 99<br />

6.25 Wie<strong>der</strong>findung nach Perchlorsäure–Zellaufschlussverfahren, gemessen mit<br />

Triple Quadrupol LC–MS ............................101<br />

6.26 Wie<strong>der</strong>findung von E. coli Zellen nach Methanol–Quenching; Einfluss von<br />

Temperatur(links)undVerweildauer(rechts) .................103<br />

6.27 Links: AMP und PEP in Zellextrakten (schwarze Quadrate) und in methanolischen<br />

Quenching Überständen (graue Kreise), die aus <strong>der</strong> Kalibration<br />

berechneten Konzentrationsniveaus <strong>der</strong> MS-Peakfläche sind mit einem<br />

Sternchen markiert und als horizontale Linien eingetragen; Rechts: PEP und<br />

AMP Anteil <strong>im</strong> Zellextrakt bezogen auf die Gesamtmenge ..........104<br />

6.28 Linearer erster Teil <strong>der</strong> Aromatenbiosynthese mit den drei verwendeten<br />

StämmenundihrerEinordnungindenBiosyntheseweg............107<br />

6.29 Fed–Batch Fermentationsprozess mit Glukosepuls und Einteilung des ProzessesindreiPhasen<br />

...............................107<br />

6.30 Biomassespezifische Produktkonzentration von E. coli DAH(P) in Fed–<br />

Batch Exper<strong>im</strong>enten mit Glukosepuls mit (A) 25 %, (B) 50 % und (C) 75<br />

% Glukosel<strong>im</strong>itierung; Proben <strong>der</strong> ersten (○), zweiten (△) und dritten (�)<br />

Phase durch Symbole unterschieden; Liniengraphen durch lineare Regression<br />

für Phase II und III ermittelt, Korrelationskoeffizient (R) für jede Phase dargestellt;<br />

Grafik (D) zeigt den Flussunterschied in die Aromatenbiosynthese<br />

für die drei L<strong>im</strong>itierungsstufen . . . .......................109<br />

6.31 Biomassespezifische Produktkonzentration von E. coli DHS in Fed–Batch<br />

Exper<strong>im</strong>enten mit Glukosepuls mit (A) 50 % und (B) 75 % Glukosel<strong>im</strong>itierung;<br />

Proben <strong>der</strong> ersten (○), zweiten (△) und dritten (�) Phase durch<br />

Symbole unterschieden; Liniengraphen durch lineare Regression für Phase<br />

II und III ermittelt, Korrelationskoeffizient (R) für jede Phase dargestellt;<br />

Grafik (C) zeigt den Flussunterschied in die Aromatenbiosynthese für die<br />

zwei L<strong>im</strong>itierungsstufen .............................111<br />

6.32 Biomassespezifische Produktkonzentrationen von E. coli S3P in Fed–Batch<br />

Exper<strong>im</strong>enten mit Glukosepuls mit 50 % Glukosel<strong>im</strong>itierung; S3P in erster<br />

(○), zweiter (△) und dritter (�) Phase, Shik<strong>im</strong>at in erster (•), zweiter (�)<br />

und dritter (�) Phase und DHS in erster (+), zweiter (∇) und dritter (⋄)<br />

Phase durch Symbole unterschieden; Liniengraphen durch lineare Regression<br />

für Phase II und III ermittelt, Korrelationskoeffizient (R) für jede Phase<br />

dargestellt;.....................................113<br />

vii

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