Arrestin hetero/oge Expression/l Mutagenese und biophy,sikalische Untersuchungen

ERGEBNISSE
3.6.2.
Kristallisation von modifiziertem, wildtypischem Arrestin aus
S. cerevisiae
Die Resultate del' optimiertcn Kristallisationsbedingungen von MRGS-6His-Arrestin,
Arrestin-ol-Iis und Arrestin-Strep'Tagll sind in Tab. 3.5. zusammengefaBt.
Tabelle 3.5.:
Protein Konzentration Reservoirpuffer, Kristallgriille Dauer del' Darstellung
Tropfengrdfle (langste Krlstallbildung (Proteinim
Kante)
SDS.Gel)
MRGS- -36 mg/ml 10:4,2 III 0,60mm 1 Tag Abb.3.12.,
6His- 10:7, 2 III 1,00mm 1 Woche Spur 11
Arrestin 10:7,4 III 0,45 mm 3 Tage
10:10zulO:4,2 III 0,20mm 4 Wochen
MRGS- -9mg/ml 10:3,2 III 0,48mm 1 Woche Abb.3.12.,
6His- Spur 10
Arrestin
Arrestin- -10 mg/ml 10:3, O,l1mm 3 Tage Abb.3.13.,
6His 10:4, 0,14mm 3 Tage Spur 15
Arrestin- -26mg/ml 10:3 0,29mm 1 Tag Abb.3.13.,
6His 10:4 0,25 mm 1 Tag Spur 16
Arrestin- -16 mg/ml 10:3 0,14mm 3 Tage Abb.3.14.,
StrepTagII Spur 18
Abbildung 3.24.: FUr Arrestin typische, orthorhombische, prismatische Kristallc von Arrestin-6His. Bei
ungestbrtem Kristallwachstum werden bevorzugt die FHichen {IOO}, (OIO) und {DOl} ausgebildet. In der linken Abbildung
hat der Kristall eine Kantenlange von ca. O.2xO.2xO.2 mm'. Das Bild rechts zeigt bet 3 der 4 Kristalle eine bevorzugte
Ausdehnung entlang der [OOI]-Richtung.