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resúmenes de ponencias - Asociación Española de Biopatología ...

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Conclusiones<br />

1) Se observa una prevalencia elevada <strong>de</strong> resistencia a betalactámicos, incluyendo al<br />

AMC para E.coli, que por otra parte constituye el 72 % <strong>de</strong> las ITU hospitalarias. 2)<br />

La FO podría ser una buena alternativa por su bajo nivel <strong>de</strong> resistencia para E.coli. 3)<br />

El CP no es una buena opción como tratamiento empírico en ITU hospitalaria por su<br />

alto porcentaje <strong>de</strong> resistencia y la posibilidad <strong>de</strong> aparición <strong>de</strong> cepas resistentes a otra<br />

quinolonas, principalmente LVX.4) La AMX sigue siendo efectiva para la ITU por<br />

enterococo. 5) Los carbapenemes (IMI) serían una buena alternativa en casos <strong>de</strong><br />

riesgo <strong>de</strong> infección por P.aeruginosa.<br />

061<br />

DETECCIÓN LEGIONELLA EN AGUAS MEDIANTE CULTIVO Y PCR A<br />

”TIEMPO REAL”<br />

OCETE MOCHÓN, M.; LLUCIÁN RAMBLA, R.; ALFONSO SÁNCHEZ, J.;<br />

MARCAIDA BENITO, G.; SÁEZ TORMO, G.; DONDERIS TORRENS, S.;<br />

Centro <strong>de</strong> Diagnostico Biomédico. Servicio Anális - Valencia<br />

Objetivo: Comparar los resultados obtenidos con dos <strong>de</strong> los métodos disponibles<br />

para la <strong>de</strong>tección <strong>de</strong> Legionella spp. en muestras <strong>de</strong> agua. El cultivo, consi<strong>de</strong>rado<br />

como método <strong>de</strong> referencia y la PCR a “tiempo real” (PCR-RT).<br />

Material Y Métodos: Se analizan 140 muestras <strong>de</strong> agua proce<strong>de</strong>ntes <strong>de</strong> la red <strong>de</strong><br />

distribución <strong>de</strong> agua sanitaria (caliente y fría) mediante:<br />

1.Cultivo: según el procedimiento <strong>de</strong> trabajo <strong>de</strong>scrito en la Norma UNE-ISO<br />

11731:1998. Demuestra la presencia o ausencia <strong>de</strong> Legionella y estima el nº <strong>de</strong><br />

unida<strong>de</strong>s formadoras <strong>de</strong> colonias (ufc) en un volumen <strong>de</strong> muestra original.<br />

2.PCR –RT para la amplificación <strong>de</strong> un fragmento específico <strong>de</strong>l genoma <strong>de</strong> la<br />

bacteria. Se efectúa en las siguientes fases:<br />

Concentración <strong>de</strong> las muestras <strong>de</strong> agua por filtración, lisis bacteriana, extracción y<br />

purificación <strong>de</strong> los ácidos nucleicos (“High Pure Template Preparation Kit (Roche®),<br />

<strong>de</strong>tección y cuantificación <strong>de</strong> Legionella mediante LightCycler 2.0 (Roche®)<br />

utilizando para la mezcla <strong>de</strong> reacción el kit LightCycler Fast-Sart DNA Master Plus<br />

Hybridization Probes (Roche®) y un control interno <strong>de</strong> inhibición (Light Cycler<br />

Control Kit DNA (Roche®).<br />

Se utilizan cebadores que amplifican un fragmento <strong>de</strong> 386-pb <strong>de</strong>l gen 16S rRNA <strong>de</strong><br />

Legionella. Los productos <strong>de</strong> amplificación se <strong>de</strong>tectan mediante el empleo <strong>de</strong> sondas<br />

<strong>de</strong> hibridación marcadas por fluorocromos. Los resultados se expresan nºcopias<br />

DNA/Litro.<br />

Análisis estadístico: mediante el test Chi-Cuadrado para los resultados cualitativos y<br />

regresión lineal para cuantitativos<br />

Resultados<br />

De las 142 muestras <strong>de</strong> aguas analizadas el resultado <strong>de</strong>l análisis fue positivo en 42<br />

(30%) <strong>de</strong> los cultivos y en 54 (38.57%) por PCR-RT. Existe asociación,<br />

estadísticamente significativa (p

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