INMUNOLOGÍA BÁSICA – CURSADA 2012 La Inmunología estudia ...

Bibliografía1. Wyllie J. Currents Protocols in Immunology.1994.2. Margni R.A. Inmunología e Inmunoquímica. Fundamentos. Editorial Médica PanamericanaS A 1996.3. Baehner RL, Nathan DG. Quantitative nitroblue tetrazolium test in chronic granulomatousdisease. N.Engl. J. Méd. 278: 971-976. 1968.4. Abramson JS, Wheeler JG. The Neutrophil. Oxford University Press. 1992.5. Aderem A, Underhill DM. Mechanisms of phagocitosis in macrophages. Ann Rev Immunol1999. 17:593-623.ComplementoEl sistema de complemento (C) está formado por unas 30 proteínas del suero queinteraccionan entre sí de modo regulado formando una cascada enzimática que permite unaamplificación de la respuesta inmune humoral.Las principales consecuencias de la activación del C son:1. Lisis del microorganismo o célula diana2. Opsonización, con la consiguiente mejora de la fagocitosis y destrucción delmicroorganismo fagocitado3. Quimiotaxis sobre los fagocitos4. Acción anafilotóxica,5. Eliminación de inmunocomplejos circulantesEl complemento puede activarse por tres vías:1. La vía alternativa, en la que interacciona directamente con la superficie del microorganismo.2. La vía de las lectinas, una especie de variante de la vía clásica, pero que se inicia sinnecesidad de anticuerpos3. La vía clásica, a través de la interacción del C con inmunocomplejos.Las tres rutas comparten las últimas fases, consistentes en el ensamblaje del denominadocomplejo de ataque a la membrana (CAM).El complemento puede ser estudiado para determinar su concentración o funcionalidad enun animal sospechoso de padecer una inmunodeficiencia o una enfermedad autoinmune. Laconcentración de los factores del complemento en un suero problema se miden porinmunodifusión simple radial o prueba de Mancini (ver capítulo sobre reacciones secundarias).La funcionalidad del complemento en un suero problema se evalúa por la técnica de hemólisis.Por otra parte, el complemento puede ser utilizado como un indicador de que la reacciónAg-Ac tuvo lugar, ya sea para identificar antígenos como anticuerpos. Por ejemplo, la lisis porcomplemento se puede utilizar para tipificar grupos sanguíneos en animales utilizandoanticuerpos específicos. Mientras que, la técnica de fijación de complemento se emplea paradetectar Acs específicos para el diagnóstico de algunas enfermedades infecciosas, utilizandoun Ag de referencia.Fundamentos de la hemólisis mediada por complemento:Cuando a una suspensión de GR sensibilizados con anticuerpos específicos se le agregacomplemento, se produce la hemólisis y la consiguiente liberación de hemoglobina (Hb) en elsobrenadante. Esta concentración de Hb está en función directa con el grado de hemólisis quetuvo lugar en la muestra y puede ser evaluada por absorción a 542 nm en unespectrofotómetro. Los estudios de cinética de esta inmuno-hemólisis han demostrado que lasensibilidad de estas valoraciones es mayor cuando el título se establece sobre la base de ladosis de complemento que produce la lisis del 50% de los hematíes del sistema.Esto tiene una explicación clara si se analiza la curva que resulta de graficar los porcentajes dehemólisis en función de la cantidad de complemento agregado al sistema, puede observarseque dicho gráfico no corresponde a una recta, sino a una curva sigmoidea que presenta unamarcada pendiente en la zona que va del 25 al 75% de hemólisis. Los extremos de la curva,23