INMUNOLOGÍA BÁSICA – CURSADA 2012 La Inmunología estudia ...

Bibliografía1. Ramayo. L G, Soba M G, Mundo S L. Evaluación de la inmunidad celular en caninos:prueba de proliferación de linfocitos in vitro. InVet, 2005, 7 (1): 63-70.2. Letwin, Bruce and Quimby, Fred. Effects of concanavalina-A, phytohemagglutinin,pokeweed mitogen, and lipopolysaccharide on the replication and immunoglobulin synthesisby canine peripheral blood lymphocytes in vitro. Immunology Letters, 14 (1986/1987), 79-85.3. Krakowa, Steven, Ringer, Susan. Activation specificity of commonly employed mitogens forcanine B- and T- lymphocytes. Veterinary Immunology and Immunopathology, 11 (1986),281-289.4. Krakowa, Steven et al. Immunosuppression by canine distemper virus: modulation of in vitroimmunoglobulin synthesis, interleukin release and prostaglandin E2 production. VeterinaryImmunology and Immunopathology, 15 (1987), 181-201.5. Millen, G.L. et al. Vaccination of racing greyhounds: effects on humoral and cellularimmunity. Veterinary Immunology and Immunopathology, 49 (1995), 101-113.6. Cook G. et al. Transforming growth factor beta from multiple myeloma cells inhibitsproliferation and IL-2 responsiveness in T lymphocytes. J. Leukoc. Biol. 1999 Dec; 66 (6):981-988.7. Choudhry MA, Hockberger PE, Sayeed MM. PGE2 suppresses mitogen-induced Ca2+mobilization in T cells. Am. J. Physiol. 1999 Dec.; 277 (6 Pt 2): R1741-8.8. Freitag KA et al. Acute starvation and subsequent reffeding affect lymphocyte subsets andproliferation in cats. J. Nutr. 2000 Oct.;130 (10): 2444-9.Técnica de SeroneutralizaciónSe define como seroneutralización a la prueba que detecta la pérdida de infectividadde un microorganismo (virus o bacteria) o de toxicidad (toxinas) que se produce in vitro por laacción de anticuerpos específicos presentes en el suero.Dada la importancia que tiene la aplicación de esta técnica en virología, la explicación de lamisma será realizada basándonos en estos microorganismos.Fundamentos de la reacciónLa reacción consiste en mezclar un virus y el suero que se intenta evaluar y determinar si lacapacidad infectante del virus se modifica (por la presencia de anticuerpos neutralizantes) o no.La combinación de virus y suero generalmente es débil y en ocasiones el virus no seinactiva durante el proceso. Por esta razón, la reacción en un primer estadio puede serreversible si se somete la mezcla a ciertas condiciones como vibración iónica, centrifugación,variaciones de pH o simplemente dilución y las partículas virales vuelven a ser infecciosas.Existe una relación entre la reversibilidad de la reacción virus-anticuerpo y el tiempo y latemperatura de incubación. Cuanto mayor sea el tiempo de incubación, la reacción virusanticuerposerá cada vez más estable. La temperatura y el tiempo utilizados dependen del tipode virus y el huésped con que se trabaja. Generalmente se utiliza 1 hora a 37 ºC, pero losprotocolos varían según el sistema y se fijan para poder comparar resultados.Una de las explicaciones del fenómeno de neutralización es que el anticuerpo específicoenvuelve a la partícula viral e impide que ésta se ponga en contacto con las célulassusceptibles.Algunos autores afirman que hay dos etapas en la neutralización:1) Formación de partículas no infectivas pero absorbibles a las células por los sitios libres delvirus.2) Formación de partículas no infectivas ni absorbibles, por bloqueo de todos los sitios activos.La presencia del virus no neutralizado se detecta a través de diferentes sistemas como cultivoscelulares (ya sean primarios, secundarios o líneas celulares), animales de laboratorio (ratones,hámster, etc.) o embriones de pollo (utilizando distintas vías de inoculación: corioalantoidea,alantoidea, cavidad amniótica, cerebral, venosa, etc.).98