INMUNOLOGÍA BÁSICA – CURSADA 2012 La Inmunología estudia ...

PRUEBA DE COOMBSLa aglutinación es la manifestación visible de una reacción Ag-Ac en la cual el Ag esparticulado, como por ejemplo las bacterias y los eritrocitos.Sin embargo, en algunos casos, si bien tiene lugar la reacción Ag-Ac no se produce laesperada manifestación visible, o sea, la formación de lo que se denomina “enrejado” y que sevisualiza en forma de aglutinación.Diversas son las causas que pueden concurrir para producir este efecto:a- Exceso de Acs: En este caso, cada molécula de Ac se uniría con la totalidad de susvalencias a una misma partícula antigénica. Así, sería imposible la formación del enrejadopues no se producirían puentes de Acs entre las moléculas de Ag.b- Presencia de Acs monovalentes: Son Acs que debido a determinadas características deglicosilación se comportan como monovalentes, imposibilitando la formación del enrejado.Los Acs contra Ags eritrocitarios pertenecen en su mayoría a este grupo.c- Defecto de Acs: La cantidad de Acs específicos contra el Ag es muy escasa, y no alcanzapara formar un enrejado del tamaño suficiente como para que resulte visible.La prueba de Coombs, también llamada de la antiglobulina, permite evidenciar estasreacciones Ag particulado-Ac mediante el agregado de anti-Igs de la especie. Las anti-Igsagregadas (también llamadas suero de Coombs), harán de puente entre las regiones Fc de losAcs unidos a las partículas antigénicas, formando de este modo el enrejado que se ve en formade aglutinación. La prueba de Coombs puede ser directa o indirecta.La técnica de Coombs directa consiste en el agregado de la anti-Ig a una suspensión departículas de la que nos interesa saber si ya llevan unidas anticuerpos. El diagnóstico de laanemia hemolítica autoinmune, caracterizada por la presencia de auto-Acs contra los eritrocitospropios, constituye un ejemplo de uso de esta técnica directa y consiste en el agregado delsuero de Coombs a una suspensión de eritrocitos de un animal sospechoso de sufrir laenfermedad.La técnica de Coombs indirecta, en tanto, consiste en el agregado de anti-Ig de la especie auna reacción previa de aglutinación que ha resultado negativa. Por lo tanto, implica dos pasos:una primera incubación de la suspensión de Ag particulado con el antisuero y una segundaincubación luego del agregado del suero de Coombs. De este modo podemos diferenciar losresultados falsos negativos, cualquiera sea la causa que los provoque, de los resultadosnegativos reales debidos a la ausencia de Acs específicos. La prueba de Coombs indirectaresulta de suma utilidad para evidenciar los fenómenos de prozona y para la tipificación degrupos sanguíneos. La reacción de Coombs se esquematiza en la figura 1.Figura 192