UNIVERSITA' DI ROMA “LA SAPIENZA” - Padis

More documents

Recommendations

Info

Indice 1 Introduzione ...................................................................................................................... 4 1.1 La Malaria e i vettori ................................................................................................... 4 1.2 I protagonisti della malattia ......................................................................................... 5 1.2.1 L’uomo .................................................................................................................. 5 1.2.2 Il vettore ................................................................................................................ 6 1.2.3 Il plasmodio ........................................................................................................... 7 1.3 Ciclo biologico ............................................................................................................. 9 1.3.1 Il plasmodio nell’uomo: ciclo esoeritrociario ..................................................... 10 1.3.2 Il plasmodio nell’uomo: fase eritrocitaria ........................................................... 10 1.3.3 Il plasmodio nell’Anofele: fase sporogonica ...................................................... 11 1.4 Clinica ........................................................................................................................ 13 1.5 Strategie e bersagli nella lotta antimalarica ............................................................... 14 1.6 Epidemiologia ............................................................................................................ 20 1.6.1 Vettore idoneo ..................................................................................................... 20 1.6.2 Indici entomologici di trasmissione .................................................................... 22 1.6.2.1 Tasso di Inoculazione Entomologica ............................................................ 22 1.6.2.2 Tasso di Riproduzione di Macdonald ........................................................... 23 1.6.2.3 Capacità vettrice ........................................................................................... 25 1.6.2.4 Indice di stabilità .......................................................................................... 25 1.6.3 Indici parassitologici di trasmissione .................................................................. 26 1.6.4 Indicatori sierologi di trasmissione ..................................................................... 28 1.7 Interazione zanzara-ospite ......................................................................................... 30 1.7.1 Le ghiandole salivari e la saliva .......................................................................... 30 1.7.2 Risvolti applicativi dello studio sulle ghiandole salivari .................................... 32 1.7.3 gSG6 (gambiae Salivary Gland protein 6) .......................................................... 36 1.7.4 Anophelin/cE5 ..................................................................................................... 38 2 Scopo della tesi ................................................................................................................ 40 3 Materiali e Metodi .......................................................................................................... 42 3.1 Area di studio e popolazione ..................................................................................... 42 3.2 Osservazioni entomologiche ...................................................................................... 43 3.3 Espressione e purificazione di proteine salivari ........................................................ 44 3.4 ELISA ........................................................................................................................ 44 2
3.5 Analisi statistica ......................................................................................................... 45 4 Risultati e discussioni ..................................................................................................... 47 4.1 Espressione e purificazione di gSG6 di An. gambiae ................................................ 47 4.2 Densità anofeliche nei due villaggi campionati ......................................................... 49 4.3 Analisi della risposta IgG anti- gSG6 di An. gambiae ............................................... 51 4.3.1 Immunogenicità di gSG6 .................................................................................... 51 4.3.2 Variazione del titolo anticorpale in accordo alla stagione di trasmissione ......... 53 4.3.3 Risposta anticorpale alla proteina salivare gSG6 nei due gruppi etnici: Mossi e Fulani ............................................................................................................................ 56 4.3.4 Variazione del titolo anticorpale con l’età .......................................................... 61 4.4 Analisi delle sottoclassi IgG1 e IgG4 anti- gSG6 di An. gambiae ............................ 70 4.4.1 Variazione stagionale dei livelli di IgG1 e IgG4................................................. 70 4.4.2 Differenze inter-etnica dei livelli di IgG1 e IgG4 ............................................... 73 4.4.3 Variazione dei titoli di IgG1 e IgG4 con l’età ..................................................... 74 4.5 Analisi comparativa della risposta IgG alla proteina salivare gSG6 di Anopheles funestus e di Anopheles gambiae ..................................................................................... 78 4.5.1 Espressione e purificazione di gSG6 di Anopheles funestus ............................... 78 4.5.2 Immunogenicità di gSG6 di An.funestus ............................................................. 80 4.5.3 Variabilità stagionale della risposta a gSG6 di An.funestus ................................ 82 4.5.4 Confronto della risposta anticorpale ai tre marcatori .......................................... 82 4.6 Analisi della risposta anticorpale alla proteina salivare: anofelina ............................ 84 4.6.2 Immunogenicità dell’anofelina ........................................................................... 84 4.6.3 Confronto della risposta anticorpale all’anofelina e a gSG6 di An. gambiae ..... 85 4.6.4 Differenze di sensibilità tra anofelina e gSG6 .................................................... 87 5 Conclusioni ...................................................................................................................... 90 6 Bibliografia ...................................................................................................................... 93 3
Page 1: UNIVERSITA’ DI ROMA “LA SAPIENZ
Page 5 and 6: 1.2 I protagonisti della malattia D
Page 7 and 8: zuccherini di origine vegetale. Le
Page 9 and 10: meridionale; P. malariae e P. ovale
Page 11 and 12: produrrà altri merozoiti, in numer
Page 13 and 14: 1.4 Clinica L’esito della malatti
Page 15 and 16: zone temperate era strettamente col
Page 17 and 18: Figura 1.7 Una delle misure di lott
Page 19 and 20: parallelo delle conoscenze sulla fa
Page 21 and 22: Vi sono infatti alcune fondamentali
Page 23 and 24: altri). Inoltre, la stima dell’EI
Page 25 and 26: 1.6.2.3 Capacità vettrice La capac
Page 27 and 28: dell’immunità acquisita dell’i
Page 29 and 30: isposta anticorpale della durata di
Page 31 and 32: Figura 1.11 Immagini al microscopio
Page 33 and 34: longipalpis aumenta considerevolmen
Page 35 and 36: protein or protein family1 comment
Page 37 and 38: Figura 1.13 Effetto della deplezion
Page 39 and 40: negativamente (D8, D13, E14, D18, D
Page 41 and 42: diverse gSG6, così come all’anof
Page 43 and 44: Figura 3.1 Area di studio Il campio
Page 45 and 46: Ig Antigene [Ag] Diluzione AbI Dilu
Page 47 and 48: 4 Risultati e discussioni 4.1 Espre
Page 49 and 50: A B Figura 4.4 (A) Analisi della fr
Page 51 and 52: del 58,5% (p=0,01) e del 94,5 % (p=
Page 53 and 54:
Figura 4.8 Distribuzione dei valori
Page 55 and 56:
differenza nel titolo anticorpale t
Page 57 and 58:
Figura 4.12 Livelli di OD nei respo
Page 59 and 60:
e 1995) si assiste ad un aumento si
Page 61 and 62:
contatto cellulare e/o produzione d
Page 63 and 64:
110% 100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 3
Page 65 and 66:
Ago ‘96 Ott ‘96 M 0,414 (23) F
Page 67 and 68:
anticorpale diminuisce gradualmente
Page 69 and 70:
Fase 2: in pochi giorni, e dopo alt
Page 71 and 72:
Figura 4.22 Andamento stagionale de
Page 73 and 74:
emerge che le IgG4 sono associate a
Page 75 and 76:
Figura 4.25 Stratificazione dei liv
Page 77 and 78:
anni con un picco intorno ai 5 anni
Page 79 and 80:
10 kDa UN MW IN Figura 4.28 Analisi
Page 81 and 82:
OD OD OD 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.
Page 83 and 84:
Figura 4.33 Confronto stagionale de
Page 85 and 86:
OD 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2
Page 87 and 88:
Inoltre, dalla Fig. 4.37 si deduce
Page 89 and 90:
combinato di gSG6 e anofelina, poss
Page 91 and 92:
completamente in accordo con l’ip
Page 93 and 94:
6 Bibliografia Aalberse, R. C., S.
Page 95 and 96:
medical Books Ltd. Bruce-Chwatt, L.
Page 97 and 98:
De Carneri, I. (1997). Parassitolog
Page 99 and 100:
mosquitoes." Bulletin Institut Past
Page 101 and 102:
protein." Am J Trop Med Hyg 61(4):
Page 103 and 104:
e2472. Pouvelle, B., R. Spiegel, et
Page 105 and 106:
Shaukat, A. M., J. G. Breman, et al
Page 107:
107
show all

UNIVERSITA' DI ROMA “LA SAPIENZA” - Padis

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?