UNIVERSITA' DI ROMA “LA SAPIENZA” - Padis

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comparate mediante test del Chi-quadro. I programmi utilizzati per l’analisi statistica sono stati i seguenti: Statistica 8 (StatSoft Inc, Tulsa, USA) e GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA). 46
4 Risultati e discussioni 4.1 Espressione e purificazione di gSG6 di An. gambiae Come precedentemente menzionato, la proteina salivare gSG6 è stata espressa dal Dott. R. Ronca presso il Dipartimento di Biologia Strutturale e Funzionale dell’Università Federico II. Per completezza vengono qui riportati i passaggi principali dell’espressione e purificazione della proteina in E. coli. Dopo induzione dell’espressione con IPTG, la presenza della proteina è stata verificata mediante elettroforesi su gel di poliacrilammide in presenza di SDS. Come è possibile osservare in Fig. 4.1 la proteina è presente in abbondanza nel campione (banda a circa 13kDa). Figura 4.1 Analisi dell’espressione di gSG6 in E.coli (Un=campione non indotto; Ind= campione indotto; MW= marcatore di peso molecolare). La solubilità della proteina è stata verificata mediante sonicazione ed analisi delle frazioni, solubile ed insolubile. La proteina gSG6 è risultata presente nella porzione insolubile e di conseguenza è stato necessario solubilizzarla con agenti denaturanti. Una volta isolata dai corpi di inclusione è stata sottoposta a cromatografia d’affinità in condizioni denaturanti ed il grado di purificazione di gSG6 dopo cromatografia d’affinità è mostrata nella Fig. 4.2. 47
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De Carneri, I. (1997). Parassitolog
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protein." Am J Trop Med Hyg 61(4):
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Shaukat, A. M., J. G. Breman, et al
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