Приоритетные аспекты изучения проблемы ТБ/ВИЧ в условиях ...
Приоритетные аспекты изучения проблемы ТБ/ВИЧ в условиях ...
Приоритетные аспекты изучения проблемы ТБ/ВИЧ в условиях ...
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
<strong>Приоритетные</strong> <strong>аспекты</strong> <strong>изучения</strong> <strong>проблемы</strong> <strong>ТБ</strong>/<strong>ВИЧ</strong> <strong>в</strong> усло<strong>в</strong>иях <strong>в</strong>ысокой распространенности <strong>ВИЧ</strong>-инфекции и ограниченных ресурсо<strong>в</strong>странах с <strong>в</strong>ысоким уро<strong>в</strong>нем распространенности <strong>ВИЧ</strong>, какБразилия, Гондурас и Эфиопия (79-80). Однако метод MODS<strong>в</strong>се еще должен пройти <strong>в</strong>алидацию <strong>в</strong> рамках программнойдеятельности, особенно для использо<strong>в</strong>ания у людей,жи<strong>в</strong>ущих с <strong>ВИЧ</strong>. Кроме того, при осущест<strong>в</strong>лении программможет <strong>в</strong>озникнуть необходимость <strong>в</strong> рассмотрении<strong>в</strong>опросо<strong>в</strong> контроля качест<strong>в</strong>а и различий <strong>в</strong> результатах,полученных разными исследо<strong>в</strong>ателями.Также были разработаны другие культуральные методыс использо<strong>в</strong>анием т<strong>в</strong>ердых питательных сред, например,колориметрический метод определения тимидинкиназы,тест на нитратредуктазу и посе<strong>в</strong> на тонкий слой агара. Этиметоды могут использо<strong>в</strong>аться для обнаружения ростамикобактерий до поя<strong>в</strong>ления <strong>в</strong>идимых колоний или для<strong>в</strong>изуального определения устойчи<strong>в</strong>ости к изониазиду ирифампицину (81). Необходимо про<strong>в</strong>ести исследо<strong>в</strong>анияпригодности их использо<strong>в</strong>ания как <strong>в</strong> рамках программнойдеятельности, так и среди контингенто<strong>в</strong> населения с<strong>в</strong>ысокой распространенностью <strong>ВИЧ</strong>-инфекции.Постано<strong>в</strong>ка экспресс-реакций с использо<strong>в</strong>аниеминдикаторной полоски для определения <strong>в</strong>идо<strong>в</strong>ойпринадлежности <strong>в</strong>озбудителя поз<strong>в</strong>оляет обнаружи<strong>в</strong>ать<strong>ТБ</strong>-специфический антиген (MPB64) <strong>в</strong> культурах,полученных на жидких или т<strong>в</strong>ердых питательныхсредах для подт<strong>в</strong>ерждения наличия M. tuberculosis, идифференциро<strong>в</strong>ать рост данного штамма от роста других<strong>в</strong>идо<strong>в</strong> микобактерий. Результаты теста получают через 15минут, причем он отличается <strong>в</strong>ысокой чу<strong>в</strong>ст<strong>в</strong>ительностью(98,6%) и специфичностью (97,9%) (45).2.2.3 Техника <strong>в</strong>ыя<strong>в</strong>ления амплификации генаМетоды амплификации нуклеино<strong>в</strong>ых кислот поз<strong>в</strong>оляют<strong>в</strong>ыя<strong>в</strong>лять нуклеино<strong>в</strong>ые кислоты микобактерий за 3–6часо<strong>в</strong>, <strong>в</strong> осно<strong>в</strong>ном с использо<strong>в</strong>анием полимеразнойцепной реакции (ПЦР). Результаты мета-анализапоказали <strong>в</strong>ыраженные различия <strong>в</strong> оценке надежностинекоммерческих и серийно <strong>в</strong>ыпускаемых тест-системдля <strong>в</strong>ыя<strong>в</strong>ления M. tuberculosis <strong>в</strong> образцах мокроты (82-83). Исследо<strong>в</strong>ания с применением изотермическойамплификации ДНК по LAMP-технологии <strong>в</strong>се еще <strong>в</strong>есьмаограничены.Специальное устройст<strong>в</strong>о «Xpert MTB device» (компанияCepheid, штат Калифорния, Соединенные ШтатыАмерики [США]) я<strong>в</strong>ляется перспекти<strong>в</strong>ной, полностьюа<strong>в</strong>томатизиро<strong>в</strong>анной системой, <strong>в</strong> осно<strong>в</strong>е которой лежитпринцип молекулярного <strong>в</strong>ыя<strong>в</strong>ления M. tuberculosis.Продемонстриро<strong>в</strong>ана <strong>в</strong>озможность с помощью этойсистемы <strong>в</strong>ыя<strong>в</strong>лять <strong>в</strong>озбудителя <strong>ТБ</strong> <strong>в</strong> большинст<strong>в</strong>еобразцо<strong>в</strong> с отрицательным результатом микроскопиимазка и про<strong>в</strong>одить скрининг на устойчи<strong>в</strong>ость крифампицину за 90 минут (84). По данным трех тесто<strong>в</strong>на <strong>в</strong>ыя<strong>в</strong>ление культурально подт<strong>в</strong>ержденного <strong>ТБ</strong> сотрицательным мазком мокроты, чу<strong>в</strong>ст<strong>в</strong>ительностьметода соста<strong>в</strong>ила 90,2% (95% ДИ: 84,9%-93,8%) и 97,6%(95% ДИ: 94,4%-99,0%) при определении устойчи<strong>в</strong>ых крифампицину штаммо<strong>в</strong>, если сра<strong>в</strong>ни<strong>в</strong>ать с результатамифенотипического метода определения чу<strong>в</strong>ст<strong>в</strong>ительности.Имеются пред<strong>в</strong>арительные данные, указы<strong>в</strong>ающие нато, что <strong>в</strong>озможна адаптация этой тест-системы дляопределения <strong>в</strong>ирусной нагрузки <strong>ВИЧ</strong>.Метод «FASTPlaque TB» (компания Biotec Laboratories,Ипс<strong>в</strong>ич, СК) осно<strong>в</strong>ан на технологии амплификациибактериофаго<strong>в</strong>. Эта система была тщательноапробиро<strong>в</strong>ана, <strong>в</strong> том числе <strong>в</strong> усло<strong>в</strong>иях <strong>в</strong>ысокойраспространенности <strong>ВИЧ</strong>-инфекции, но полученныерезультаты оказались проти<strong>в</strong>оречи<strong>в</strong>ыми (68).ВОЗ одобрила практическое использо<strong>в</strong>ание д<strong>в</strong>ухкоммерческих тест-систем, <strong>в</strong> осно<strong>в</strong>е которых лежитпринцип обратной гибридизации с типоспецифическимизондами с использо<strong>в</strong>анием ПЦР дезоксирибонуклеино<strong>в</strong>ойкислоты (ДНК) и последующей гибридизации ДНК для<strong>в</strong>ыя<strong>в</strong>ления штаммо<strong>в</strong> M. tuberculosis и часто <strong>в</strong>стречающихсямутаций M. tuberculosis, с<strong>в</strong>язанных с устойчи<strong>в</strong>остьюк рифампицину и изониазиду (система «GenotypeMDRTBplus», компания Hain Lifescience, Германия, и система«INNO-LiPA Rif.TB», компания Innogenetics NV, Бельгия) (85).Обе технологии обладают необходимым потенциалом длясокращения периода постано<strong>в</strong>ки диагноза и определениялекарст<strong>в</strong>енной чу<strong>в</strong>ст<strong>в</strong>ительности до д<strong>в</strong>ух дней, если дляанализа используются образцы положительной по мазкумокроты непосредст<strong>в</strong>енно от пациента. Молекулярныеметоды обратной гибридизации с типоспецифическимизондами требуют наличия хорошо оснащеннойлабораторной сети для постано<strong>в</strong>ки ПЦР. Предъя<strong>в</strong>ляемыек лабораториям требо<strong>в</strong>ания предусматри<strong>в</strong>ают наличиеотдельных помещений для подгото<strong>в</strong>ки и анализа образцо<strong>в</strong>,соот<strong>в</strong>етст<strong>в</strong>ующих материало<strong>в</strong> и методо<strong>в</strong> для удаленияотходо<strong>в</strong>, профессионально подгото<strong>в</strong>ленного персоналаи системы <strong>в</strong>нешней оценки качест<strong>в</strong>а. В настоящее <strong>в</strong>ремя<strong>в</strong> дополнение к этому про<strong>в</strong>одится оценка методо<strong>в</strong>определения специфических последо<strong>в</strong>ательностейДНК M. tuberculosis, с<strong>в</strong>язанных с устойчи<strong>в</strong>остью кфторхинолонам и инъецируемым препаратам; этопоз<strong>в</strong>олит использо<strong>в</strong>ать методы обратной гибридизациис типоспецифическими зондами для <strong>в</strong>ыя<strong>в</strong>ления <strong>ТБ</strong> сширокой лекарст<strong>в</strong>енной устойчи<strong>в</strong>остью (ШЛУ-<strong>ТБ</strong>) (86).13
Change language