Ed. 109 - NewsLab

Imuno-Elisa anti-HCV da WamaEstima-se que 3% da população mundial seja portadorade hepatite C crônica, constituindo-se num sério problemade saúde no mundo. O vírus da hepatite C é do tipo RNA,pertencente à família Flaviviridae.No Brasil são encontrados os genótipos 1a, 1b, 2a, 2b e3, com predominância do genótipo 1 sobre os outros (60% do1 contra 40% dos outros). O genótipo 1 tende a não ter boaresposta ao tratamento em relação aos demais.Os fatores de risco associados à transmissão do HCV são,principalmente, as exposições através de transfusão e transplantede doadores infectados e uso de drogas injetáveis, emmenor proporção hemodiálise e acidentes perfurocortantes.Outros fatores incluem a transmissão sexual e contatocom familiares HCV positivos. Associado a estes se encontraum alto percentual de pacientes (45%) sem causa específica.O Imuno-Elisa anti-HCV da Wama é um teste imunoenzimáticoque utiliza proteínas recombinantes Core, NS3,NS4 e NS5 do HCV para detectar a presença de anticorposanti-HCV no soro ou plasma humano.Princípio do método - as cavidades da microplaca sãorecobertas com múltiplas epítopes de proteínas do vírus HCV(fase sólida). Quando anticorpos anti-HCV estão presentes naamostra de soro ou plasma, eles reagem com as proteínasrecombinantes da fase sólida.O material não ligado é removido por lavagem. Umconjugado de anti-IgG humana de camundongo marcadacom peroxidase se ligará aos anticorpos IgG anti-HCV. Umsubstrato (TMB) é adicionado, o qual revelará uma cor azulnas cavidades onde a enzima peroxidase estiver presente,indicando a presença de anticorpos anti-HCV.Uma solução stop ácida para bloqueio da reação enzimáticaé adicionada, a qual mudará a cor da solução para amarela. Aabsorbância é então medida a 450 nm. A concentração de anticorposanti-HCV é diretamente proporcional à intensidade da corda reação. Sensibilidade de 100% e especificidade de 99,50%.Em um estudo realizado com 300 amostras de soro e plasmaobtidas de um laboratório de referência, das quais 100 erampositivas e 200 negativas, foram determinadas a sensibilidadee especificidade do kit Imuno-Elisa anti-HCV da Wama.Sensibilidade = verdadeiros positivos / (verdadeiros positivos+ falsos negativos) x 100Especificidade = verdadeiros negativos / (verdadeirosnegativos + falsos positivos) x 100VerdadeirospositivosFalsospositivosVerdadeirosnegativosFalsosnegativosSensibilidade(%)Especificidade(%)Resultado 100 1 199 0 100 99,50A precisão intraensaio foi determinada ensaiando duas amostras de soros positivos, uma alta e outra baixa, em 20 replicatas.Amostras positivas Número de vezes Média das absorbânciasDesviopadrãoCV(%)Alta 20 1,056 0,058 5,4 %Baixa 20 0,323 0,024 7,4 %A precisão interensaio foi determinada ensaiando dois pools de soros positivos em 20 diferentes corridas.Amostras positivas Número de vezes Média das absorbânciasDesviopadrãoCV(%)Registro MS: 10310030130Alta 20 1,099 0,077 7,0 %Baixa 20 0,334 0,031 9,2 %: (16) 3377-9977 / : atendimento@wamadiagnostica.com.br / : www.wamadiganostica.com.br78NewsLab - edição 109 - 2012