CapÃtulo01 - Embrapa Uva e Vinho

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36 R. M. Valdebenito Sanhueza et al.isto, após sete dias de crescimento, as culturas do fungo foram raspadas e asuspensão de esporos obtida foi filtrada. Esta suspensão foi diluída em meio líquidoBDA (1:1; 1/1) a 40ºC. Por fim, as cromatofolhas foram pulverizadas com umasuspensão de 10 5 esporos de A. brassicicola. Após 48 h de incubação a 25ºC, foramobservadas zonas de inibição fúngica (halos brancos, visto que o fungo possuicoloração escura. O delineamento usado nos experimentos foi o completamentecasualizado, com cinco repetições/tratamento.3.3. Avaliação de formulações de fosfito de potássio no controle pósinfeccionalde Colletotrichum gloeosporioides em macieiraOs trabalhos foram realizados em laboratório e em casa-de-vegetação, naEstação Experimental de Fruticultura de Clima Temperado da Embrapa Uva e Vinho.As plantas foram incubadas com 100% de umidade, para se ter uma maior aberturados estômatos. Findo este período, as mudas foram inoculadas com umasuspensão de 3x10 5 conídios/mL do isolado CGF1 de C. gloeosporioides e mantidasno escuro a 100% UR e 22ºC por 48h.As mudas foram tratadas às 48 horas após a inoculação (HAI): com asdoses de registro dos seguintes fosfitos, com suas respectivas marcas eformulações e doses p.c.: (a) 40-20: Bio 40-20/Biosul Fertilizantes, 0%(N)-40%(P 2O 5)-20%(K 2O), 150mL/100L; e (b) 40-20: Phós-k 0-40-20/OxiquímicaAgrôciencia, 0%(N)-40%(P 2O 5)-20%(K 2O), 150mL/100L. Plantas testemunhas foramtratadas com água destilada. Avaliou-se a severidade da MFG conforme Araújo et al.(2008), estimando-se visualmente a porcentagem de tecido necrosado de quinzefolhas de um ramo aos cinco, seis, sete, oito e dez dias após a inoculação (DAI).Com estes dados, calculou-se área abaixo da curva do progresso da doença(AACPD). O delineamento usado nos experimentos foi o completamentecasualizado, com e três repetições/tratamento. Os resultados foram submetidos àanálise de variância, seguido do teste de separação de médias SNK (α≤0,05), comos softwares Statistica 6,0 – Stat Soft ® , versão 2001.Experimento 4:Sobrevivência, fisiologia e variabilidade de isoladosde Cryptosporiopsis sp. associados a doença olhode-boiem macieira4.1. Isolamento e características das colônias e conídios dos isoladosem diferentes meio de culturaA. Isolamento dos isolados de Cryptosporiopsis spTodos os experimentos foram realizados no Laboratório de Fitopatologia daEmbrapa Uva e Vinho em Vacaria – RS. Os isolados foram obtidos de frutos comsintomas de podridão “olho-de-boi” em maçãs de diferentes pomares da região Suldo Brasil.Para o isolamento, os frutos foram desinfetados superficialmente com álcooletílico hidratado 92° e lavados com água destilada esterilizada. Fragmentos detecidos com a podridão olho-de-boi foram retirados das margens das lesões ecolocados em meio de cultura BDA contido em placas de Petri. As placas foram
Caracterização e controle das doenças de verão 37mantidas a 21 ºC com fotoperíodo de 12 horas. Após o crescimento das colônias,culturas monospóricas de cada isolado foram transferidas para tubos de vidro comBDA e preservados a 4°C. As colônias dos isolados foram inicialmente cultivadosem BDA e incubadas durante 14 dias com fotoperíodo de 12 horas e temperaturade 21ºC. Nas placas de Petri com os diferentes meios de cultura foi substituído umdisco central com 5 mm de diâmetro por outro com o mesmo diâmetro com o micéliode cada isolado. As placas foram mantidas a 21 °C com fotoperíodo de 12 horas. Osisolados utilizados neste experimento fazem parte da coleção monospórica deCryptosporiopsis sp da Embrapa Uva e Vinho (Tabela 1). Em todos os experimentosutilizou-se isolados monospóricos com 15 dias (Figura 1).Tabela 1. Origem dos isolados de Cryptosporiopsis sppCódigo dos isolados Local de origem Ano de coletaCp 1 São Francisco de Paula / RS 2002Cp 2 São Francisco de Paula / RS 2002Cp 3 São Francisco de Paula / RS 2002Cp 4 Vacaria / RS 2002Cp 5 Fraiburgo / SC 2003Cp 6 Vacaria / RS 2002Cp 7 Vacaria / RS 2003Cp 8 Vacaria / RS 2003Cp 9 Fraiburgo / SC 2002Cp 10 Fraiburgo / SC 2002Cp 11 Vacaria / RS 2002Figura 1. Isolado monospórico de Cryptosporiopsis sp. em meio BDA.
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