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DIVI2010 – POSTER
dass die im klinischen Alltag beobachtete erhöhte Morbidität und
Mortalität älterer Patienten eher nicht von einer eingeschränkten
Immunkompetenz herrührt, sondern durch andere Faktoren, wie die im
Alter gehäuften Komorbiditäten bedingt ist.
P/07/07
Influence of Drotrecogin Alpha (Activated) on Leptin
mRNA Expression in an in vitro Inflammatory Model of
Human Adipocytes
T. Göksu 1 , M. Behnes 1 , J. Saur 1 , S. Lang 1 , M. Brueckmann 2 ,
M. Borggrefe 1 , U. Hoffmann 1
1 1st Medical Department, Medical Faculty Mannheim, University
of Heidelberg, Mannheim, Deutschland, 2 Boehringer Ingelheim,
Ingelheim, Deutschland
Background: Leptin is an adipocyte-derived cytokine regulating energy
homeostasis, metabolism as well as immune-inflammatory processes.
Leptin also has thermogenic actions and regulates enzymes of fatty
acid oxidation. Leptin is significantly increased in response to acute
infection and sepsis and exerts direct effects on CD4+ T- lymphocyte
proliferation, macrophage phagocytosis, and secretion of inflammatory
cytokines such as IL-1 and tumor necrosis factor TNFα. We measured
mRNA expression of leptin in cell cultures of differentiated human
adipocytes after incubation with different concentrations of Drotrecogin
alpha (activated) in an in vitro inflammatory model.
Methods: We cultivated preadipocytes and differentiated them to
adipocytes. Drotrecogin alpha (activated) was added in different
concentrations (50ng/ml, 1µg/ml, 5µg/ml and 10µg/ml) and stimulated
with TNFα (1ng/ml) for 6h and 24h. The mRNA steady-state expression
of leptin was measured by real-time PCR and quantified by the
comparative C T method using GAPDH as housekeeping gene.
Results: Leptin mRNA levels decreased by 47% and 61% when
stimulated with TNFα alone for 6h and 24h. After 6h incubation with
TNFα together with increasing concentrations of Drotrecogin alpha
(activated) (50ng/ml, 1µg/ml, 5µg/ml and 10µg/ml) mRNA levels of
leptin did not change significantly (p>0.05), whereas after 24h mRNA
levels of leptin increased by 27% (trend p=0.066).
Conclusion: In an inflammatory model of human adipocytes incubation
with Drotrecogin alpha (activated) for 24 h increased leptin mRNA
expression in a dose dependent manner. Further in vitro and in vivo
investigations are needed to confirm these findings and to reveal the
role of Drotrecogin alpha (activated) in this context.
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P/07/08
Drotrecogin Alpha (Activated) Increases mRNA
Expression of Adiponectin in Human Adipocytes Treated
with TNF α in vitro
U. Hoffmann 1 , M. Behnes 1 , T. Göksu 1 , S. Lang 1 , J. Saur 1 , M. Brueckmann 2 ,
M. Borggrefe 1
1 1st Medical Department, Medical Faculty Mannheim, University
of Heidelberg, Mannheim, Deutschland, 2 Boehringer Ingelheim,
Ingelheim, Deutschland
Background: Adiponectin is a adipose-specific protein. In contrast to
the markedly increased levels of many other adipocytokines, as leptin or
TNFα, its level is reduced in obesity and type 2 diabetes. Adiponectin can
induce the expression of anti-inflammatory cytokines such as IL-10 and
IL-1 receptor antagonist in human monocytes and inhibits endothelial
NF-kappa-B signalling through a cAMP-dependent pathway. A possible
antiinflammatory effect of Drotrecogin alpha (activated) on adipocytes
has not yet been demonstrated. We measured mRNA expression of
adiponectin in cell cultures of differentiated human adipocytes after
incubation with Drotrecogin alpha (activated) and addition of TNFα.
Methods: Cultivated preadipocytes were differentiated to adipocytes.
After incubation with Drotrecogin alpha (activated) in concentrations of
50 ng/ml, 1 µg/ml, 5 µg/ml and 10 µg/ml and addition of TNFα (1ng/
ml) for 6h and 24h, mRNA steady-state expression of adiponectin was
measured by real-time PCR and quantified by the comparative C T
method using GAPDH as housekeeping gene.
Results: Adiponectin mRNA levels decreased significantly by 9%
and 52% after incubation with TNFα alone for 6h and 24h. After 6h
incubation with TNFα with increasing concentrations of Drotrecogin
alpha (activated) mRNA levels of adiponectin showed no significant
changes, whereas after 24h mRNA levels increased by 29% (trend
p=0.034).
Conclusion: Drotrecogin alpha (activated) increases Adiponectin
mRNA expression of human adipocytes after 24h in an in vitro
inflammatory model in a dose dependent way. This mechanism may
indicate the anti-inflammatory response of adipocytes after treatment
with Drotrecogin alpha (activated). Further in vitro and in vivo
investigations are needed to confirm these findings.
P/07/09
Einfluss einer hoch-dosierten Selensubstitution auf
die perioperative systemische Inflammation bei herzchirurgischen
Eingriffen an der Herz-Lungen-Maschine
C. Stoppe 1,2 , G. Schälte 1 , A. Wildenhues 1 , S. Metzelder 1 , A.K. Menon 3 ,
R. Rossaint 1 , G. Marx 2 , S. Rex 1,2
1 Universitätsklinikum Aachen, Klinik für Anästhesiologie, Aachen,
Deutschland, 2 Universitätsklinikum Aachen, Fachübergreifende Klinik
für Operative Intensivmedizin Erwachsene, Aachen, Deutschland,
3 Universitätsklinikum Aachen, Klinik für Thorax-, Herz- und Gefäß-
chirurgie, Aachen, Deutschland
Einleitung: Vorangegangene Studien an kritisch kranken Patienten
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konnten bereits einen deutlichen Selenmangel nachweisen, welcher mit
erhöhtem oxidativen Stress, der Entstehung eines Multiorganversagens
und konsekutiv erhöhter Letalität verbunden war[2]. Patienten nach
herzchirurgischen Eingriffen mit Herz-Lungen-Maschine(HLM) zeigen
regelhaft das Bild eines systemischen Inflammations-Syndroms(SIRS),
welches mit einem perioperativer Abfall des Selen-Spiegels verbunden
ist[3].
Fragestellung: Wir hypothetisierten, dass eine präventive präoperative
Selensubstitution das Ausmaß eines postoperativen SIRS
bei kardiochirurgischen Patienten verringern kann.
Methoden: In dieser prospektiven Studie wurden 100 Patienten
eingeschlossen, die sich einem herzchirurgischem Eingriff an der HLM
unterzogen(mittleres Alter(±SD) 65±12J.;EuroScore:5,8±3,8). Nach
Einleitung der Anästhesie erhielten alle Patienten 2000µg Natriumselenit
i.v. sowie 1000µg Natriumselenit an jedem weiteren Tag auf der
Intensivstation. Die Messung des Selengehalts im Vollblut erfolgte nach
Einleitung, 4h nach Aufnahme auf die Intensivstation und an jedem
weitern Morgen auf der Intensivstation vor erneuter Selensubstitution.
Die statistische Analyse erfolgte mittels ANOVA.
Ergebnisse: Unmittelbar präoperativ zeigte sich bei allen Patienten
ein deutlicher Selenmangel mit Selenspiegeln unterhalb der
europäischen Referenzwerte [Fig. 1A].Die präoperative Selengabe
führte zunächst zu einem Ausgleich des Selendefizites, konnte jedoch
den Selenabfall ab dem 1. postoperativen Tag nicht verhindern.
Während des weiteren Verlaufs stabilisierten sich die Selenspiegel
unter Fortführung des Substitutionsregimes. Im Vergleich mit einer
historischen Kontrollgruppe ohne Selensubstitution konnte durch die
perioperative Selensubstitution keine Verminderung der perioperativen
Inflammation erreicht werden, wie der Verlauf des Serum-Procalcitonin-
Spiegels zeigt[Fig. 1B].
[Perioperativer Verlauf der Selenspiegel und PCT]
Schlussfolgerung: Herzchirurgische Patienten zeigen trotz
präoperativer hoch-dosierter Selensubstitution einen drastischen
Selenabfall am 1.postoperativen Tag. Dies bietet eine mögliche
Erklärung für die ausbleibende Abschwächung der postoperativen
Entzündungsreaktion.
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P/07/10
Humanes Angiotensin III zur Behandlung von
Sepsislangzeitfolgen
I. Niehaus 1
1 Priv., Kronshagen, Deutschland
Fragestellung: Untersuchung der Wirkung von dem Lipopolysaccharid
bindendem Heptapeptid Angiotensin III (Ang III) zur Behandlung von
Sepsisspätschäden anhand eines Fallberichtes.
Methodik: µmol orale Dosen von Ang III werden zur Behandlung von
neurologischen und mirkozirkulatorischen Sepsislangzeitschäden bei
einer Pat. eingesetzt.
Ergebnisse: Die erste orale Dosis von 0.1 mg (= 0.113 µmol ) Ang III
verursachte keine Blutdruckänderung, aber eine verbesserte
Durchblutung fühlbar durch Erwärmung zunächst in den Extremitäten,
nach 1 Std. in den inneren Orangen verbunden mit einem muskelentspannenden
Effekt. Nach 4 Std. normalisierte sich die Ruhepulsfrequenz
auf 60-65 Schläge/min, vorher bestand seit der Sepsis von
vor 15 Jahren Tachykardie mit einem Ruhepuls von 75-105 Schlägen/
min. Nach 18 Std. zeigte sich eine bleibende Verbesserung der Motorik
des linken Beines mit zurückkehrender Muskelkraft sowie verbesserte
Feinmotorik, Seh- und Hörfähigkeit. Diese Effekte sind permanent.
Schlussfolgerungen: Ang III wird in vivo gebildet aus Ang II durch
die enzymatische Abspaltung von Asp am N-terminalen Ende. Ang
III ist ein Heptapeptid mit der Aminosäuresequenz von Arg 1 -Val 2 -Tyr 3 -
Ile 4 -His 5 -Pro 6 -Phe 7 . Arg 1 -His 5 stellt eine Lipopolysaccharid-bindende
Pentapeptidsequenz dar gemäß dem Muster von B-H-P-H-B (B: Arg + ,
Lys + , His + ; H: hydrophob; P: polar). Ang III bindet an Angiotensin II Typ
1 (AT 1 -) und Typ 2 (AT 2 -)-Rezeptoren.
LPS kann daher den Blutdruck steigernden Effekt von Ang II/III
blockieren durch:
1. Direkte Bindung an die Aminosäruen Arg 1 -His 5 von Ang II
2. Bindung an die dritte intrazelluläre Schleife des AT1-Rezeptors mit
Blockierung
der Bindung des G-alpha-Proteins mit Verlust des intrazellulären
Signaltransfers.
[Angiotensinrezeptor]
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