2007 - Instituto de InvestigaciÃ³n Sanitaria La Fe

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cer of Valencia Community. Identification of a novelBRCA1 large genomic rearrangement in a Spanishbreast/ovarian cancer family”. Breast Cancer ResTreat. 2007 Dec 1; [Epub ahead of print].Valenciana. Consellería de Sanidad. Control de Calidadde los Laboratorios Clínicos de la ComunidadValenciana. Adicionalmente, forma parte del grupode expertos del Plan Oncológico de la ComunidadValenciana. Consellería de Sanidad.OTROS MÉRITOSEl Dr. Pascual Bolufer Gilabert forma parte del Programade Evaluación de Calidad de los LaboratoriosClínicos de la Comunidad Valenciana. Generalitat35 - Memoria 2007
4.2.4. Biología ypatología celularResponsable:Jaime Renau PiquerasEquipo:M. Pilar Marín Muela, Manuel Portolés Sanz, Luis MegíasMegías, Gustavo Egea Gurí, Guillermo Esteban Pretel, RaúlBallestín Hinojosa, Marina Blázquez Risco, María TeresaHuerta Prats, Inmaculada Montserrat SerranoDESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD INVESTIGADORALa actividad investigadora durante el año 2007 secentró en cumplir los objetivos reseñados en el proyectoSAF2005-00615 y que se referían, principalmente,al análisis del efecto de la exposición crónicaal etanol sobre el tráfico intracelular en células nerviosas(neuronas y astrocitos). Dicho tráfico concerníano solo al proceso de exocitosis sino también altransporte nucleocitoplásmático.• Dicha exposición altera el número y distribuciónde poros nucleares y de algunas proteínas asociadasa estas estructuras y a la envoltura nuclear.• El etanol afecta los niveles de varias proteínasimplicadas en el proceso de exportación, perono de aquellas que participan en el proceso deimportación.Además, se analizó el efecto de dicha exposiciónsobre una serie de proteínas nucleares dependientesde cadmodulina, en particular la misma cadmodulinay las proteínas nítrico óxido sintetasa neuronal(nNOS) y αII-spectrina (α-fodrina).Esta última parte se realizó auspiciada también porla Fepad (Fundación para el Estudio, Prevención yAsistencia a las Drogodependencias).LÍNEAS DE INVESTIGACIÓNEs t u d i o d e l e f e c to d e l e ta n o l s o b r e e l t r a n s p o rt en u c l e o c i t o p l a s m á t i c oEl transporte nucleocitoplásmico es un proceso crucialpara la célula. En este trabajo hemos realizadoun análisis general del efecto de la exposición crónicaal etanol sobre dicho proceso en astrocitos encultivo primario. Para ello se han utilizado técnicasde pulso y caza con metionina tritiada, immunobloting,inmunofluorescencia, inmunoro y criofractura.Los resultados indican:• El alcohol afecta tanto la importación como la exportaciónde proteínas al núcleo.Ef e c to d e l e ta n o l s o b r e c a l m o d u l i n a, n-NOS y f o d r i n an u c l e a rSe ha estudiado el efecto de la exposición crónica adosis bajas de etanol (7 y 21días, 30 mM) sobre ladistribución intranuclear de la cadmodulina (CaM) ylas proteínas de que unen CaM, óxido nítrico sintetasaneuronal (nNOS) y αII-spectrina (α-fodrina) enastrocitos en fase de proliferación (0-7 días) y diferenciación(0-21 días).Nuestros resultados indican que todas las proteínasanalizadas aparecen localizadas en la cromatinacondensada en todos los casos estudiados aunqueexisten variaciones cuantitativas entre célulasdiferenciadas y en proliferación así como entre astrocitoscontrol y expuestos al etanol. No obstante,no hemos podido ver en ningún caso colocalizaciónentre la CaM y las otras dos proteínas.Ac c i ó n d e l á c i d o l i s o f o s fat í d i c o s o b r e l o s n i v e l e s d ef o s f o i n o s í t i d o s y a c t i va c i ó n d e Rh oA e n a s t r o c i t o se x p u e s t o s a l e ta n o lLa exposición crónica al etanol afecta tanto la glicosilacióncomo el tráfico de proteínas en astrocitosen cultivo primario. Nuestros estudios anteriores in-36 - Fundación para la Investigación del Hospital Universitario La Fe - Memoria 2007
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