Untersuchungen zum Vorkommen und zur gesundheitlichen ...

Bei den kultivierungsabhängigen Methoden zeigte sich, dass im Vergleich zur
morphologischen und chemotaxonomischen Identifizierung Untersuchungen der 16S
rRNA-Gensequenz eine schnelle Zuordnung gewonnener Isolate auf Gattungs- bzw.
Gruppenebene ermöglichen. Für eine Artzuordnung unbekannter Isolate sind jedoch
zusätzliche morphologische und chemotaxonomische, z.T. auch weitere umfassende
Untersuchungen (einschl. DNA-DNA Hybridisierungen) notwendig.
Um eine effiziente Bearbeitung mit kultivierungsabhängigen Methoden zu
gewährleisten, ist eine umfassende Erfahrung bezüglich der Morphologie dieser
Organismengruppe notwendig. Hierzu müssen die typischen Kolonieformen häufig
auftretender Arten auf den verschiedenen Isolationsmedien studiert werden. Erst
dadurch ist es möglich, die unterschiedlichen Typen einer Probe bereits auf den
Primärplatten zu gruppieren und Referenzisolate für einen bestimmten Typ in Kultur
zu nehmen.
Zur Isolierung der Actinomyceten aus Materialproben mittels Kultivierung ist der
Zusatz eines Hemmstoffs zur Unterdrückung des Schimmelpilzwachstums
erforderlich. Vergleichende Untersuchungen von Cycloheximid und Natamycin in
unterschiedlichen Konzentrationen haben ergeben, dass mit einem Zusatz von 0,1
g/l Natamycin die beste Hemmung der Schimmelpilze erzielt wird.
Da bei der Kultivierung der verschiedenen Actinomyceten deren unterschiedliche
Wachstumsbedingungen zu berücksichtigen sind, ist es nicht möglich, die Isolierung
der Actinomyceten mit einem „Universalmedium“ durchzuführen. Als
Isolierungsmedien für die Actinomyceten ist Casein-Mineralagar (CMA), Brain-Heart-
Infusion-Agar (BHI), Caseinpepton-Sojamehlpepton-Agar (CASO) und Mineralagar
nach Gauze geeignet.
Die Ausprägung der koloniemorphologischen Merkmale der Actinomyceten ist auf
den verschiedenen Nährmedien sehr unterschiedlich. Als Identifizierungsmedien für
luftmyzelbildende Actinomyceten sind ISP2- und ISP3-Agar geeignet, für
Actinomyceten, die kein Luftmyzel bilden, werden BHI-Agar und Medium 79
empfohlen.
Zur Beschreibung der verschiedenen morphologischen Merkmale eines Isolates
haben sich die Koloniefarbe, -form, -konsistenz, Zellform usw. bewährt, die in einem
Auswertungsformular zusammengefasst sind.
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