Untersuchungen zum Vorkommen und zur gesundheitlichen ...

2.3.6 Konservierung
Die Konservierung der Reinkulturen erfolgte bei den Projektpartnern in
unterschiedlicher Weise.
2.3.6.1 Konservierung in Glycerinmedium
(Hans-Knöll-Institut Jena und Umweltmykologie GbR Berlin)
Konservierungsmediums nach Chakrabarty et al. (1978)
Einzelkomponenten Menge
1 K2HPO4 6,3 g
2 Na-citrat 0,45 g
3 MgSO4 x 7 H2O 0,05 g
4 (NH4)2SO4 0,9 g
5 KH2PO4 1,8 g
6 Glycerin 44,0 g
7 Aqua dest. 500 ml
Das sterile Medium wurde in sterile Mikrogefässe abgefüllt und 1:1 mit der gut
gewachsenen Bakteriensuspension gemischt. Alternativ wurde eine Impföse von
einer Plattenkultur abgenommen und im Konservierungsmedium suspendiert. Die
Aufbewahrung erfolgte bei -70 °C.
2.3.6.2 Konservierung in Micronic-Röhrchen (Universität Gießen)
Ein Volumen von 0,5 ml sterilem Kälberserum (Bio Wittaker TM , NBS newborn bovine
serum, Lonza, Belgium) wurden in zuvor autoklavierte Micronicröhrchen (1,4 ml Utubes,
Micronic B.V., Niederlande) pipettiert. Anschließend wurden ca. 3 Impfösen
der Kultur (bei fest in den Agar wachsenden Kulturen mit Agarstückchen) von der
Agarplatte abgenommen und in Micronicröhrchen mit Kälberserum überführt. Für
jede Kultur wurden drei parallele Röhrchen angefertigt, die dann bei -20 °C (2x) und
-80 °C (1x) in Micronicboxen (Reusable Tubeholder-96, PC, Micronic B.V.,
Niederlande) getrennt voneinander konserviert wurden.
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