Reinigungsleistung von Membranbelebungsanlagen bezüglich ...

Reinigungsleistung von Membranbelebungsanlagenbezüglich hygienischer Parameter Seite 38Tabelle 8 Herkunft der Chemikalien und Medien für Ames Test.Chemikalien Abkürzung FirmaDimethylsulfoxid DMSO Merck, Darmstadt, DeutschlandBacto Agar -- BD, Ontario, CanadaNutrient broth II -- Oxoid, Hampshire, EnglandZitronensäure -- Sigma, St. Louis, USANatriumphosphat Na 2 HPO 4 Merck, Darmstadt, DeutschlandNatriumamoniumphosphat NaNH 4 HPO 4 Merck, Darmstadt, DeutschlandKaliumphosphat K 2 HPO 4 Merck, Darmstadt, DeutschlandMagnesiumsulfat MgSO 4 .7H 2 O 2 Merck, Darmstadt, DeutschlandS9-Mix -- MP Biomedicals LLC, Ohio, USAβ-Nicotinamid Adenin dinucleotid PhosphatNatriumhydratβ-NADPH Sigma, St. Louis, USAL-Histidin -- Sigma, St. Louis, USAd-Biotin -- Sigma, St. Louis, USATetracyclin -- Sigma, St. Louis, USAAmpicilin -- Sigma, St. Louis, USAGlucose C 6 H 12 O 6 Merck, Darmstadt, DeutschlandNatriumchlorid NaCl Sigma, St. Louis, USANatriumazid NaN 3 Sigma, St. Louis, USA2,4,7-Trinitro-9-Fluorenon TNF Sigma, St. Louis, USA2-Aminoanthracen 2AA Sigma, St. Louis, USAEthylacetat C 4 H 8 O 2 Merck, Darmstadt, DeutschlandMethanol CH 4 O Merck, Darmstadt, DeutschlandMethylenchlorid CH 2 CL 2 Merck, Darmstadt, Deutschland2-Amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b]Pyridin Phip Nard Institute, Amagasaki, Japan5.4.2.2 BakterienstämmeFür die Untersuchungen wurden die Stämme TA 98, TA 100 und YG 1024 jeweils mit und ohneS9 eingesetzt. Diese Stämme stammen von Tamara Grummt (Umweltbundesamt Bad Elster,Deutschland). Die Übernachtkulturen wurden aliquotiert und in PBS mit 5% DMSO in flüssigemStickstoff tiefgefroren. Vor Durchführung der Experimente wurden die Stämme auf Stammplattenkultiviert.Die Stammplatten wurden zur Herstellung der Übernachtkulturen verwendet, im Kühlschrankgelagert und alle 6 Wochen erneuert. Die Prüfung der Stämme auf genetische Identität (Δuvr, rfa,pKM101) erfolgte wie von MARON und AMES (1984) beschrieben. S9-Leberhomogenat vonArochlor 1254 induzierten Sprague Dawley Ratten wurde von MP Biomedicals (LLC, Ohio, USA)gekauft. Als Positivkontrollen wurden für die Bakterientests die in Tabelle 9 angeführtenSubstanzen eingesetzt:Tabelle 9 Positivkontrollen für Ames Test a, 1 .Stamm Positivkontrolle a Konzentration / PlatteTA 98 ohne S9 TNF 0,1 µg / PetrischaleTA 100 ohne S9 NaN 3 1,5 µg/PetrischaleYG 1024 ohne S9 TNF 0,1 µg/PetrischaleTA 98 mit S9 PhiP 2,5 µg/PetrischaleTA 100 mit S9 2AA 2,0 µg/PetrischaleYG 1024 mit S9 2AA 2,0 µg/Petrischalea… Positivkontrolle: TNF (2,4,7-Trinitro-9-Fluorenon), NaN 3 (Natriumazid) , 2AA (2-Aminoantracene),Phip (2-Amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b]Pyridin.1… nach UKEMS (KIRKLAND, 1990).Endbericht Kapitel 5 April 2010