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W I S S E N S C H A F T Abb. 1: Regulatoren der Kalzifizierung in Arterien und Weichgeweben. Ein zu hohes Kalzium x Phosphat-Produkt, meist einhergehend mit einem sekundären Hyperparathyreoidismus, gilt als Hauptrisikofaktor für ektopische Kalkablagerungen. Daneben gibt es eine Reihe von Proteinen, die lokal auf bestimmte Stimuli hin im Gewebe exprimiert werden und dort die Kalzifizierung aktivieren. Dieser Prozeß kann insbesondere bei einem relativen Mangel an Inhibitoren beschleunigt ablaufen. A B Abb. 2: Makroskopische Ansicht von Herz und Lunge von 10 Monate alten Wildtyp- (A) und Fetuin- A-Knock out-Mäusen (B). Die Organe wurden nach Präparation mit Alizarinrot angefärbt. Während im Herzen der Knock out-Maus hauptsächlich linienförmige Strukturen positiv gefärbt sind, waren in den Lungenflügeln eine Vielzahl kleiner rundlicher Kalziumphosphat-Präzipitate nachweisbar. In den Organen der Wildtyp-Maus konnten keine Kalzifizierungen festgestellt werden. Kennziffer 16 LW 06 · www.biocom.de � Weichgewebskalzifizierungen in einer Reihe von Hauptorganen, wie etwa Lunge, Niere und Herz 5 (siehe Abb. 2). Bei älteren Fetuin-Adefizienten Mäusen kommt es aufgrund der fortschreitenden Kalzifizierung in der Niere zur Beeinträchtigung der Funktion. Danach entwickelt sich nach klassischem Muster ein sekundärer Hyperparathyreoidismus, wie es auch bei Patienten mit terminaler Niereninsuffizienz zu beobachten ist 6 . Nephelometrische Bestimmung des Fetuin-A-Spiegels im Menschen Nach anfänglichen Messungen der Fetuin-A-Serumspiegel mit einem indirekten ELISA-Assay verwenden wir jetzt die Methode der Nephelometrie als eine sehr verläßliche und schnelle Technik zur Messung der Fetuin-A-Konzentration im Blut. Die Nephelometrie wird mit dem gleichen polyklonalen Fetuin-A-Kaninchen-Antikörper durchgeführt wie vorausgehende ELISA-Messungen 7 . Die Übertragung der mittels ELISA gewonnenen Konzentrationen auf die Nephelometrie-Streulichtmessung erfolgte durch entsprechende Verdünnungsreihen. Der polyklonale Fetuin-A-Kaninchen-Antikörper reagiert nicht mit Fetuin-B, einem nahe verwandten Protein mit bisher ungeklärter Funktion 8 . Die Präanalytik gestaltet sich einfach, da sich Fetuin-A im Serum auch nach zweitägiger Lagerung bei Raumtemperatur stabil zeigte. Davon ausgenommen sind Proben von Patienten mit Septikämie oder Coagulopathien, die eine erhöhte proteolytische Aktivität im Serum aufweisen können 9 . Die Nephelometriemethode mißt linear zwischen 0,05 und 2,6 g/L Fetuin-A im Serum. Die Präzisionswerte sind für die Intra-Assay-Präzision ein Variationskoeffizient (VK) von 7,75% und für die Präzision von-Tag-zu-Tag ein VK von 8,5%. Normwerte In einem großem Kollektiv von fast 1.000 nicht dialysepflichtigen Patienten (80% mit einer glomerulären Filtrationsrate von >60 ml/min, mittleres Alter 67 Jahre) konnte ein Normwert für Fetuin-A von 0,4-1,0 g/L definiert werden (siehe Abb. 3, S. 14). Fetuin-A-Serumwerte sind geschlechtsabhängig. Frauen haben höhere Werte als Männer. Darüber hinaus besteht eine Altersabhängigkeit (siehe Abb. 4, S. 14). Generell treten bei allen getesteten Tierspezies die höchsten Fetuin-A-Serumkonzentrationen in der Phase des stärksten Knochenwachstums auf, was vermutlich damit zu tun hat, daß in dieser Phase besonders viel Kalzium und Phosphat im Körper mobilisiert werden 12 | 6. Jahrgang | Nr. 6/2005 LABORWELT
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