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Prevalência de resistência a antimicrobianos em isolados ...

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Capítulo II<br />

Ana Martins<br />

2. Material e Métodos ................................................................................. 37<br />

2.1. Meios <strong>de</strong> cultura e Soluções 38<br />

2.1.1. Meios <strong>de</strong> cultura 38<br />

2.1.2. Soluções <strong>de</strong> Antibiótico 42<br />

2.1.3 Soluções stock e tampões <strong>de</strong> pH 43<br />

2.2. Área <strong>de</strong> estudo 45<br />

2.3. Recolha <strong>de</strong> amostras <strong>de</strong> água 47<br />

2.4. Quantificação, isolamento e i<strong>de</strong>ntificação microbiológica 47<br />

2.4.1. Método <strong>de</strong> filtração por m<strong>em</strong>brana 48<br />

2.4.2. Quantificação das estirpes bacterianas 49<br />

2.4.3 I<strong>de</strong>ntificação das estirpes bacterianas 51<br />

2.4.4. Medição dos valores <strong>de</strong> pH 52<br />

2.5. Testes <strong>de</strong> suscetibilida<strong>de</strong> antimicrobiana – Método <strong>de</strong> difusão <strong>em</strong> disco (Kirby-<br />

Bauer) 53<br />

2.5.1. Índice <strong>de</strong> multir<strong>resistência</strong> antimicrobiana (MDR) 53<br />

2.6. Transconjugações 54<br />

2.7. Biologia Molecular 54<br />

2.7.1. Extração DNA total <strong>de</strong> E.coli 54<br />

2.7.2. Determinação da concentração e pureza <strong>de</strong> DNA por espectrofotometria 55<br />

36

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