Prevalência de resistência a antimicrobianos em isolados ...

Prevalência de resistência a antimicrobianos em isolados ambientais de Escherichia coli e enterococos
2.5. Testes de suscetibilidade antimicrobiana – Método de difusão em
disco (Kirby- Bauer)
O método utilizado para avaliar a suscetibilidade das estirpes de E. coli e enterococos
foi o de difusão em disco também designado por Kirby-Bauer. Este tem como
finalidade determinar se a estirpe em estudo é sensível ou apresenta um perfil de
resistência aos antimicrobianos testados. Este método foi realizado segundo as
especificações do CLSI. Efetuou-se a inoculação de uma suspensão bacteriana
equivalente a 0,5 McFarland na superfície de meio de MH, com espessura de 4mm. Para
avaliar a suscetibilidade das estirpes de E. coli foram distribuídos discos com 19
antimicrobianos pertencentes a classes distintas na superfície do meio inoculado:
ampicilina (AMP, 10µg), cefalotina (KF, 30µg), cefotaxima (CTX, 30µg), cefoxitina
(FOX, 30µg), ceftazidima (CAZ, 30µg), aztreonamo (ATM, 30µg), amoxicilina/ácido
clavulânico (AMC, 20/10µg), imipenemo (IPM, 10µg) gentamicina (CN, 10µg),
tobramicina (TOB, 10µg), amicacina (AK, 30µg), estreptomicina (STR, 10µg),
kanamicina (K, 30µg), ácido nalidixico (NA, 30µg), ciprofloxacina (CIP, 5µg),
cloranfenicol (CHL, 30µg), nitrofurantoína (F, 300µg), trimetoprim/sulfametoxazol
(SXT, 1,25/23.75) e tetraciclina (TET, 30µg) (Oxoid). As estirpes de enterococos foram
avaliadas quanto à sua suscetibilidade a 12 antimicrobianos: ampicilina (AMP, 10µg),
azitromicina (AZM, 15µg), gentamicina (CN, 10µg), rifampicina (RD, 5µg),
quinupristina/dalfopristina (QD, 15µg), ciprofloxacina (CIP, 30µg), tetraciclina (TET,
30µg), eritromicina (ERY, 15µg), cloranfenicol (CHL, 30µg), nitrofurantoína (F,
300µg), vancomicina (VAN, 30µg) e teicoplanina (TEC, 30µg) (Oxoid). Após
incubação a 37ºC durante 18horas, determinou-se o diâmetro dos halos, sendo o
resultado expresso em suscetível (S), intermédio (I) ou resistente (R).
2.5.1. Índice de multirresistência antimicrobiana (MDR)
O índice de multirresistência a antimicrobianos foi determinado através da razão entre o
valor total de resistências expressas pelo isolado testado e o total de agentes
antimicrobianos aplicados no teste de suscetibilidade antimicrobiana (Krumperman.
1983; Florea, 2011).
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