Aspectos Legais para Abertura de LaboratÃƒÂ³rios de ... - NewsLab

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Foi utilizado um total de 52 ratos Wistars adultos distribuídos em machos (n=26) e fêmeas (n=26), onde os mesmos foram divididos em 12 grupos. Nos animais tratados de ambos os sexos, foi administrado o antibiótico amoxicilina diluída em 1 mL de solução salina 0,9%, por via oral, através do método de gavagem. As concentrações farmacológicas utilizadas para a realização do experimento objetivou dois aspectos: (1) alta concentração farmacológica; (2) concentração elevada nos animais, porém, que não provocassem mortes dos mesmos. A concentração de 125 mg foi dada através de uma única administração, enquanto a dose de 250 mg foi distribuída em duas administrações em dias consecutivos. Para a diluição do medicamento utilizamos eppendorffes e com auxílio de pipeta automática de 1 mL, adicionou-se a solução salina 0,9%. Na administração do medicamento foram usadas cânulas de irrigação revestidas com dispositivo plástico, acopladas às seringas de 1 mL. Realizou-se uma abertura cirúrgica em duas ratas. Para a visualização dos órgãos internos, utilizamos o anestésico Ketamina (10%) e o relaxante muscular Xilazina, ambos na concentração de 0,1 mL/100g de peso (i.m.). Para a realização da cirurgia usamos a mesa cirúrgica, tesoura, bisturi e seringa com agulha para a administração dos medicamentos supracitados. Métodos Antes da administração do medicamento, todos os animais que foram submetidos ao teste não se alimentaram por um período de aproximadamente 5 horas que antecedia a administração do mesmo, objetivando a eficiência no mecanismo de absorção intestinal. Os animais tratados com uma dose única de 125 mg do antibiótico foram submetidos ao acasalamento após 24 horas da administração farmacológica. Já aqueles que foram tratados com 250 mg do antibiótico, a dose foi dividida em dois dias consecutivos, e somente após 24 horas ao término da administração farmacológica é que esses animais foram submetidos ao acasalamento por um período de aproximadamente 15 dias. Após esse período, foi observada a capacidade de acasalamento e prenhez das fêmeas. Todos os animais recém-nascidos foram contabilizados e avaliados quanto ao peso, tamanho e morfologia externa. Os animais recém-nascidos tiveram acompanhamento no desenvolvimento desde o primeiro dia de vida até completarem, aproximadamente, 30 dias, onde nesse período, realizaramse pesagens dos mesmos. Após o período de acasalamento, todos os ratos machos foram sacrificados com CO 2 . As fêmeas e seus filhotes só foram sacrificados quando eles estavam com um mês de vida, em média. Particularmente, a fêmea 3 (que apresentou nascimento de todos ratos mortos) foi submetida à ação cirúrgica (Figura 2), sob o efeito do anestésico, onde uma abertura na região abdominal foi realizada, verificando-se ainda a presença de fetos intra-uterinos mortos. Figura 2. Rata 3 após cirurgia, mostrando na figura seu útero contendo dois filhotes mortos, sendo um deles com malformação Resultados e Discussão Para a compreensão dos resultados, elaboramos no Quadro 1 os cruzamentos realizados associando os animais que receberam ou não a amoxicilina nas concentrações de 125 ou 250 mg/oral. Além disso, este mesmo Quadro 1 ilustra o período de gestação contabilizado a partir do início do período de acasalamento, número de filhotes vivos, mortos e aqueles que apresentaram efeito de teratogenicidade. O peso e tamanho dos animais estão apresentados neste trabalho no formato de Anexo, para que possa ser apreciado. Posto que há dificuldade na observação do momento exato do acasalamento machos e fêmeas, os resultados dos dias de gestação das fêmeas são uma estimativa, pois não tem como haver um monitoramento constante 24h. É importante ressaltar que todos os ratos (machos e fêmeas) ficaram submetidos ao acasalamento durante um período de 15 dias. Analisando as médias feitas dos resultados (Quadro 2), no grupo A podemos observar que a média do número de filhotes está dentro do desvio permitido, e em relação à média dos dias de gestação verificou-se que está abaixo da variação permitida pelo desvio, porém, de acordo com conceitos literários está dentro do padrão. Os grupos B e C foram os que apresentaram valores dentro do padrão segundo a média de gestação e média do número de filhotes nascidos. Porém, no grupo C os machos (n=5) tratados com 250mg do medicamento, observou-se uma redução significativa do número de filhotes resultantes do cruzamento C9 quando comparado com a média do número de filhotes NewsLab - edição 89 - 2008 185
Quadro 1. Resultados observados nos cruzamentos entre machos e fêmeas que receberam amoxicilina em diferentes concentrações Cruzamento Período de Nº total Macho Fêmea gestação (dias) filhotes Filhotes mortos Teratogenicidade C 1 --- 250 mg 22 13 2 --- C 2 --- 250 mg 22 10 --- --- C 3 --- 250 mg 22 7 7 2 C 4 --- 125 mg 22 13 --- --- C 5 --- 125 mg 25 11 --- --- C 6 --- 125 mg --- --- --- --- C 7 250 mg --- 23 15 --- --- C 8 250 mg --- 21 13 --- --- C 9 250 mg --- 23 6 --- --- C 10 125 mg --- 23 3 --- --- C 11 125 mg --- 34 14 --- --- C 12 --- 250 mg 21 14 --- --- C 13 --- 250 mg 23 13 --- --- C 14 --- 250 mg 23 11 --- --- C 15 250 mg --- 21 14 1 --- C 16 250 mg --- 27 12 --- --- C 17 125 mg --- 21 16 --- --- C 18 125 mg --- --- --- --- --- C 19 2 mL (sol. salina) --- 21 11 1 --- C 20 1 mL (sol. salina) --- 21 13 --- --- C 21 --- 2 mL (sol. salina) 21 13 --- --- C 22 --- 1 mL (sol. salina) 21 13 --- --- C 23 250 mg 250 mg 27 11 --- --- C 24 250 mg 125 mg 27 14 1 --- C 25 125 mg 125 mg 26 11 --- --- C 26 125 mg 250 mg 27 12 2 --- Média 24 12 --- (n=12). Podemos sugerir que neste momento podem existir fatores atribuídos pela ação farmacológica, que possa estar influenciando na espermatogênese dos animais machos. No grupo D, verificou-se a redução relativamente grande do número de filhotes provenientes de um dos cruzamentos (C10) sendo este pertencente ao grupo de machos (n=4) tratados com 125mg de amoxicilina. A média do número de filhotes está dentro do desvio permitido e a média do período de gestação está excedendo a variação permitida, todavia, está de acordo com a análise estatística o geral, estando então, dentro do padrão permitido. Os grupos E, F, G e H são os do grupo controle onde macho ou fêmea recebem dosagens diferentes de solução salina (0,9%). Os resultados desses grupos estão dentro do desvio padrão permitido. Quando observamos os grupos (I, J, K e L) em que ambos os animais foram tratados com AMX, de acordo com a média feita podemos sugerir que aumentou o tempo do acasalamento pelo fato de uma possível libido alterada, e com isso observamos um tempo maior gestacional, similar aos resultados observado no grupo D. 186 NewsLab - edição 89 - 2008
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