Aspectos Legais para Abertura de Laboratórios de ... - NewsLab

espécies E. avium, E. casseliflavus,
E. durans e E. gallinarum à lista das
espécies clinicamente importantes
pertencentes ao gênero Enterococcus.
Posteriormente, 12 novas espécies
foram descritas. E. dispar, E. hirae,
E. flavescens, E. mundtii e E. raffinosus
têm sido isoladas de espécimes
clínicos humanos e de outras fontes
ambientais (11, 16). E. pseudoavium
e E. saccharolyticus têm sido isolados
de gado bovino e outros mamíferos.
E. columbae e E. cecorum têm sido
isolados de pombos e galinhas, respectivamente.
E. sulfureus tem sido
isolado de plantas (16). E. solitarius,
isolado de otites de pacientes admitidos
em um hospital público (16) e
também a partir de ruminantes (20)
é agora denominado Tetragenococcus
halophilus (27). Da mesma forma, E.
seriolicida, isolado de peixes e mastite
bovina, é agora denominado Lactococcus
garviae (26).
Os estreptococos possuidores de
antígeno do grupo D de Lancefield
eram, no passado, divididos em duas
categorias: os enterococos e os nãoenterococos.
Com a alocação dos
enterococos em uma novo gênero,
os estreptococos do grupo D são,
atualmente, em termos de importância
médica, representados pelo
Streptococcus bovis. Esses microrganismos
são positivos para o teste de
bile-esculina mas em geral negativos
para os testes de crescimento na
presença de 6,5% de NaCl e hidrólise
do ácido piroglutâmico β-naftilamida,
PYR (reações bioquímicas classicamente
utilizadas para caracterizar os
enterococos) (22).
Apresentam sensibilidade a muitos
antimicrobianos, sendo encontrados
normalmente no trato gastrointestinal.
Existe uma tendência de se encontrar
o S. bovis associado ao câncer de intestino
grosso e endocardite infecciosa
(16). Além disso, outros cocos Grampositivos
catalase(-) como Lactococcus
e Leuconostoc também hidrolisam
a esculina e podem crescer em meio
contendo 6,5% de NaCl. Procedimentos
atuais para a diferenciação entre
estas espécies são complexos e como
consequência, muitos laboratórios não
estão familiarizados principalmente
com as várias espécies de enterococos
e tendem a identificá-los incorretamente,
pois muitos laboratórios não
possuem testes de maior acurácia
para a correta identificação destas
espécies (21).
Nos laboratórios clínicos, os enterococos
têm sido identificados presuntivamente
durante anos pela sua
aparência microscópica e em meios de
cultura sólidos, além da sua habilidade
de hidrolisar a esculina na presença de
bile e de crescer na presença de 6,5%
de NaCl (7). Entretanto, pelo fato de
alguns enterococos necessitarem de
até 48 horas de incubação para que a
reação ocorra corretamente (1) e ainda
por ser freqüentemente necessária
a sua rápida identificação em casos
como sepsis e endocardites, testes
mais rápidos tem sido descritos como
forma de triagem para caracterizar
se o coco Gram-positivo isolado é um
enterococo ou não.
Um destes testes de triagem rápida
utiliza esculina a 0,2% em uma solução
tamponada de NaCl a 6,5%, com a
descrição de 239 (100%) enterococos
positivos após 2 horas de incubação
observando, também, que os S. bovis
testados geraram resultados positivos
somente após 6 horas de incubação
(23). Muitos outros sistemas de triagem
utilizam a habilidade dos enterococos
de hidrolisar o PYR. Bosley et al. (1)
relataram que todos os 78 enterococos
testados (incluindo 32 E. faecalis, 28
E. faecium, 13 E. avium e 5 E. durans)
foram positivos após 4 horas de incubação.
Várias formulações deste teste tem
sido sugeridas, resultando em reações
positivas para os enterococos em até
10 minutos (26). No entanto, trata-se
de um teste que, quando usado isoladamente
ou em conjunção somente
com os testes de rotina (bile-esculina
e NaCl 6,5%) não fornece informações
úteis com relação a identificação da
espécie em estudo.
Kits para realizar identificações bioquímicas
de espécies de enterococos
raramente são fabricados no Brasil e,
portanto, até o momento, a maioria
é importada, elevando sobremaneira
o custo final do exame, muitas vezes
impraticável pelo retorno financeiro
recebido da maioria dos convênios de
saúde. Exemplos destes kits (manuais
e automatizados) são: API 20 Strep e
Rapid ID 32 Strep (bioMérieux, França),
Strep-Zym (Rosco, Dinamarca), Pos
Combo 21 (Dade Behring, EUA) (21).
Material e Métodos
Culturas
Foram utilizados 128 isolados clínicos
humanos de enterococos neste
estudo (48 E. faecalis, 27 E. faecium,
18 E. gallinarum, 12 E. casseliflavus, 8
E. avium, 4 E. mundtii, 3 E. hirae, 2 E.
durans, 2 E. raffinosus, 2 E. solitarius,
2 E. malodoratus). Cepas padrão ATCC
(American Type Culture Collection) foram
incluídas em todos os testes como
referência e controle de qualidade (E.
faecalis ATCC 29212, E. faecium ATCC
27270, E. casseliflavus ATCC 25788,
E. durans ATCC 49135, E. avium ATCC
49464, E. gallinarum ATCC 49573, E.
hirae ATCC 10541).
Incluímos, ainda, 14 isolados clínicos
de Streptococcus bovis e duas cepas
padrão ATCC de S. bovis (ATCC 33317
e 49133) como referência. Os isolados
clínicos e as cepas padrão ATCC foram
NewsLab - edição 89 - 2008
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