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View/Open - JUWEL - Forschungszentrum Jülich

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8. Untersuchungen zur Stabilität der Benzaldehydlyase im Zweiphasensystem<br />

8.2.2. Ether<br />

Die BAL zeigt in einem organisch / wässrigen Zweiphasensystem mit Diethylether als<br />

organische Phase eine hohe Lagerstabilität. Daher wird in einem zweiten Screening<br />

die Lagerstabilität des Enzyms in Kombination mit weiteren Ethern getestet. Schon<br />

im ersten Screening haben chemisch ähnliche Lösungsmittel je nach Molekülstruktur<br />

einen unterschiedlichen Einfluss auf die Enzymstabilität gezeigt. Darum kommen im<br />

zweiten Screening Ether mit unterschiedlich strukturierten Seitenketten zur Anwendung<br />

(Tabelle 8.2).<br />

Log P Bezeichnung<br />

0,40 Tetrahydrofuran<br />

0,76 Diethylether O<br />

0,96<br />

tert-Butylmethylether<br />

(MTBE)<br />

1,40 Diisopropylether (DIPE)<br />

2,57 Di-n-butylether O<br />

Tabelle 8.2.: Verschiedene Ether, die im zweiten Lösungsmittelscreening eingesetzt<br />

werden.<br />

Neben Diethylether wird Di-n-butylether als weiterer Ether mit unverzweigten Seitenketten<br />

verwendet. Diisopropylether (DIPE) und tert-Butylmethylether (MTBE) repräsentieren<br />

Ether mit verzweigten aliphatischen Seitenketten. Tetrahydrofuran kommt<br />

als cyclischer Ether zum Einsatz. Abbildung 8.3 auf der nächsten Seite zeigt die Stabilität<br />

des Enzyms in Kombination mit den verschiedenen Ethern. Die Durchführung<br />

der Versuche wurde schon in Kapitel 8.2.1 beschrieben.<br />

Mit Ausnahme von Tetrahydrofuran bewirken alle Ether eine Stabilisierung der<br />

BAL im Vergleich zu dem Kontrollexperiment (t1/2 = 15 h). Auch bei dieser Versuchsreihe<br />

ist eine Einteilung der Lösungsmittel basierend auf ihrer Molekülstruktur<br />

möglich, was die schon in Kapitel 8.2.1 auf Seite 91 gemachten Beobachtungen bestätigt.<br />

Ether mit verzweigter Seitenkette (tert-Butylmethylether und Diisopropylether)<br />

bewirken eine höhere Enzymstabilität als Ether mit unverzweigter Seitenkette (Diethylether<br />

und Di-n-butylether). Im Gegensatz zu den Arbeiten von Mozhaev et. al.<br />

besteht auch innerhalb der Verbindugsklasse der Ether keine Korrelation der beobachteten<br />

Enzymstabilität und dem log P-Wert des verwendeten Lösungsmittels 4 .<br />

Aufgrund der hohen Lagerstabilität die die BAL in einem organisch / wässrigen<br />

4 Vergleiche hierzu (Mozhaev et al., 1989)<br />

94<br />

O<br />

O<br />

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