Forschungsprojekt Nr. 04 HS 042 Thema: Methodische ... - BLE

6.4.3 Validierung
Die Methode ist entsprechend der üblichen Verfahren zu validieren. Die Ermittlung der
Bestimmungsgrenze (BG) erfolgt dabei in der zur Kalibration verwendeten Matrix.
Validierungsparameter nach Hänel und Siebers (Hänel und Siebers, 1998):
• Ermittlung der Bestimmungsgrenze
• 5 Wiederfindungen an der BG und
• 5 Wiederfindungen an der zehnfachen BG durchführen
• Wiederfindungen sollen zwischen 70 und 110 % liegen
• Relative Standardabweichung kleiner als 20%
6.4.4 Isomeren
Wirkstoffe, die als Isomere auftreten, werden so ausgewertet, dass, sowohl bei Kalibrationsstandards
als auch Proben, die Peakflächen der einzelnen Isomeren addiert und als
Summen ausgewertet werden.
6.4.5 Ergebnisabsicherung
Werden mit der oben dargestellten Vorgehensweise im Probenextrakt Gehaltswerte für
Wirkstoffe erhalten, die die geltenden Höchstmengen für Futtermittel überschreiten, ist das
Messergebnis nach dem Verfahren der Standardaddition abzusichern.
Diese Verfahrensweise ist erforderlich, da eine exakte Matrixkalibration mit genau der
gleichen Matrix bei Mischfuttermitteln nicht möglich ist, da ein definitiv rückstandsfreies
Futtermittel exakt der gleichen Zusammensetzung i. d. R. nicht zur Verfügung steht. Der
Einfluss der Matrix auf das Messergebnis kann aber durch Standardaddition weitgehend
eliminiert werden.
Es sollten mindestens drei Aufstockungen des zu bestimmenden Wirkstoffs zur aufgearbeiteten
Probenlösung vorgenommen werden. Die Konzentrationen der Zusätze sollten in
einem sinnvollen Bereich liegen. Die folgende Tabelle 17 gibt dafür Anhaltspunkte.
Tabelle 17:
Vorschlag für Dotierungskonzentrationen im Standardadditionsverfahren
ermittelte Konzentration des
Wirkstoffs in der Messlösung
(mg/L)
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Zusatz 1
mg/L
Zusatz 2
mg/L
Zusatz 3
mg/L
0,05 0,05 0,10 0,20
0,10 0,05 0,1 0,2
0,50 0,25 0,5 0,75
1,00 0,50 1,00 1,50
Beispieltabellen für die Herstellung von Kalibrierlösungen nach externem bzw. internem
Standard sowie ein Aufstock- und Auswerteschema für die Quantifizierung mittels Standardaddition
sind im Anhang gegeben (Anlage 11).
7 Schematische Methodenbeschreibung
Die in den vorangehenden Kapiteln beschriebenen Ergebnisse aus der Arbeit der Fachgruppe
XI des VDLUFA (insbesondere Tabelle 6) wie auch aus der durchgeführten Ringanalyse
sowie Zitate aus der vorhandenen Literatur sollen im folgenden schematisch zusammengefasst
werden. Im Schema sind die Teilschritte angesprochen, denen durch Zitat