Einfluss von Mutationen auf die NS2/3-Prozessierung und die ...

MATERIAL UND METHODEN
BFA-34T: Dulbecco’s modifiziertes Eagle Medium mit folgenden Zusätzen:
Aminosäuren: 0,0178 g/l L-Alanin
22
0,0300 g/l L-Asparaginsäure
0,0700 g/l Glycin
0,0750 g/l L-Glutaminsäure
0,0250 g/l L-Prolin
Vitamine: 0,1000 mg/l Biotin
0,0250 g/l Hypoxanthin
3,7000 g/l NaHCO3
Vor Gebrauch Zugabe von 10% fötalem Kälberserum (FCS), 0,04 g/l Penicillin
und 0,07 g/l Streptomycin.
DMEM, -Cys, -Met Invitrogen, Carlsbad, CA, USA
2.1.13 Stammlösungen und Medien
Acridinorange-Stammlösung:
10 mg/ml in 1 x PBS
Acridinorange-Arbeitslösung:
Stammlösung 1 : 300 in
1x Phosphatpuffer
Ampicillin-Lösung (1.000x):
100 mg/ml in A. dest.
sterilfiltrieren,
Lagerung bei -20 °C
APS-Lösung:
10 % (w/v) APS in A. dest.
aliquotieren,
Lagerung bei -20 °C
CaCl2-Lösung:
60 mM CaCl2
15 % Glycerin
10 mM PIPES, pH 7,1
Coomassie-Lösung:
0,1 % Coomassie
DEPC-Wasser:
Brilliant blue in
Fixier-Lösung
0,1 % DEPC in Aqua bidest
über Nacht bei RT rühren
(Abzug!) und durch
Autoklavieren inaktivieren