Einfluss von Mutationen auf die NS2/3-Prozessierung und die ...

INHALTSVERZEICHNIS
II
2.2.01.5 Transfektion von RNA in MDBK-Zellen 28
2.2.01.6 Kristallviolettfärbung 29
2.2.01.7 Metabolische Markierung viraler Proteine 29
2.2.02 Transiente Expression viraler Proteine im T7-
Vacciniavirus-System 29
2.2.02.1 Radioaktive in vivo Markierung transient
transfizierter Zellen 30
2.2.03 Mikrobiologische Methoden 30
2.2.03.1 Anzucht von Bakterien 30
2.2.03.2 Dauerkulturen 30
2.2.03.3 Herstellung transformationskompetenter
Bakterien 30
2.2.03.4 Hitzeschock-Transformation von
Plasmid-DNA in Bakterien 31
2.2.03.5 Plasmidpräparation für Test-/Kontrollzwecke 31
2.2.03.6 Plasmidpräparation zur Gewinnung
größerer DNA-Mengen 32
2.2.04 Spektrophotometrische Analyse von Nukleinsäuren 33
2.2.05 Methoden zur Isolierung und Analyse von RNA 33
2.2.05.01 DEPC-Behandlung von Lösungen 33
2.2.05.02 RNA-Isolierung aus Zellen 33
2.2.05.03 RNA-Isolierung aus Zellen (peqGOLD Trifast) 34
2.2.05.04 RNA-Agarosegelelektrophorese 34
2.2.05.05 Northern Blot 35
2.2.05.5.1 Transfer von RNA auf Filter 35
2.2.05.5.2 RNA/DNA-Hybridisierung 36
2.2.06 Standard DNA-Techniken 37
2.2.06.01 Phenol/Chloroform-Extraktion von Nukleinsäuren 37
2.2.06.02 Ethanolfällung von DNA 37
2.2.06.03 Isopropanolfällung von DNA 37
2.2.06.04 Spaltung von DNA mit Restriktionsenzymen 37
2.2.06.05 Herstellung glatter Enden an DNA-Molekülen 38
2.2.06.06 Dephosphorylierung von DNA 38