Número 10-12 - Instituto de Historia de la Medicina y de la Ciencia ...

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Comunicaciones originales
INACTIVACION DEL BACTERIOFAGO DE
RHIZOBIUM MELILOTI POR BACTERIAS
AEROBIAS ESPORULADAS
Diversos autores (Demolan y Dunez,· 1935;
Vandecaveye y Katznelson, 1936; Katznelson y
Wilson, 1941; Casas Campillo, 1943) han comprobado
que el bacteriófago de Rhizobill'ln rn;eliloti se
encuentra distriblúdo con mucha amplitud en los
suelos cultivados con alfalfa.
Demolon y' Dunez (1935) después de numerosos
estudios de laboratorio y pruebas de campo,
establecieron además, que el bacteriófago, a través
Je la destrucción de R. mdiZoti, interfiere en el
proceso simbi6tico fijador de nitrógeno, originándose
así la "fatiga" de los suelos cult.ivados intensivamente
con alfalfa. Observaciones similares
acerca de este efecto nocivo del bacteriófago de
Rhizobill'll/. han sido sei'íaladas por Valldecaveye y
Katznelson (193ll), Vandecavcye, Fuller y Katznelson
(1940), Hofer (1943) y Valldecaveye y
Moodie (1944), en suelos de Norteumérica.
Por el contrario, Dorosinskii (1941) estudian­
Jo el mismo problema en suelos rusos cultivados
con trébol, conCluyó que el bacteriófago puede
existir en los suelos "fatigados" sin ser la causa
de este estado especial, y Katznelson y 'Yilson
(1941) demostraron la existencia del bacteri6fago
de R. meliloti en todas las muestras de suelos cultivados
con alfalfa recolectadas. en el Estado de
Nueva York; su presencia. fué interpretada por
estos autores como un estado nomlal de los suelos,
ya que no observaron interferencia con la fijación
simbiótica del nitrógeno.
Los resultados contradictorios obtenidos por
estos dos grupos de autores, pueden explicarse
considerando que la acci6n nociva del bacteriófago
de Rhizobium como agente que interfiere en la fijación
simbiótica del nitr6geno, está condicionada
por diverso:; factores inherentes al suelo, clima r
especie o variedad de la planta legumÍ1lOsa y cepa
de Rhizobium. Algunos de estos factores ya han
sido tomados en consideraci6n (Lairu, 1933; Demolon
y Dunez, 1935, 1939; Vandecaveye y Moodie,
1944), pero hasta la fecha no se ha logrado
ningún conocilIÚento que explique si la IIÚcroflora
del suelo puede inhibir o nulificar la actividad bacteriofágica.
Teniendo en cuenta lo anteriormente expresado,
en el presente trabajo estudiamos un grupo de
bacterias aerobias esporuladas, con el objeto
de determinar sus propiedades inactivadoras para
el bacteri6fago de Rhizobium melilo#.
PARTE EXPERIMENTAL
De las 26 cepas de bacterias aerobias esporuladas que
sirvieron para efectuar los experimentos, 21 fueron aisladas
por nosotros de semillas y las cinco restantes de 'suelos
cultivados; en diversas pruebas preliminares estas bacterias
mostraron poseer marcadas propiedades antagonistas
para bacterias patógenas Gram positivas y Gram negativlls.
La cepa de RhizobiuTn meliloti (RM-3-8) susceptible al
bacteri6fago fué aislada de los nódulos de M edicago sp. y
es la misma empleada en experimentos anteriores (Casas
Campillo, 1943).
La cepa de bacteriófago (Fl) fué aislada de un suelo
cultivado por más de tres años con alfalfa, siguiendo los
Fig. l.-Inactivación del bacteriófago de Rhizobium melilotí
por bacterias aerohias esporuladas (cepas A-6 y A-7);
método de la estría
mismos métodos descritos en un trabajo previo de este
laboratorio (Casas Campillo, 1944). La preparación de fa:"
go desarrolló el mismo tipo de colonia lftica y estuvo además
caracterizada por su estabilidad y por no permitir el
desarrollo de crecimiento secundario.
Para demostrar la actividad antifago empleamos el método
de la estría en placas de agar enriquecidas con la pre-
Fig. 2.-Inactivación del bacteritfago de Rhizobillm meliloti
por una suspensión de 'la cepa A-1-X¡ m6t.odo de loe
recuentos de placas Hticas
paración de fago y el método del cilindro, ya descritos por
Jones y Schatz (1946), con las modificaciones apropiadas
para los sistemas fago-bacteria estudiados por nosotros
(fig. 1) ¡ cuando fué necesario obtener datos acerca del grado
de inactivación del fago, se empleó el método de los recuentos
de placas líticas (fig. 2).
L03 primeros experimentos de este trabajo, estuvieron
orientados hacia la selección de cepas bacterianas aerobias