Número 10-12 - Instituto de Historia de la Medicina y de la Ciencia ...

CIENCld
Si se desea conservar por pedodos largos el S. C. A. obtenido
se puedo suspender el precipitado en -1,5 veces su
peso en agua. destilada y se liofiliza, obteniéndose un polvo
finlsimo, muy fácilmente soluble en solución reguladora, el
cual se mantiene en congelación entre -25 y-30°.
" Titulación del suero.--:-La titulación del suero por medio
de la. reacción de fijación del complemento, tlUltO en la
muestra obtenida. como en el suero purificado, 'se realizó
según la. siguiente técnica:
. I. TitulaciCn del complemento: El complemento em"
pleado fuó obtenido del suero fresco de varios cuyes y fué
titulado contra 2 unidades de hemolisina, en presencia de
0,5 cm 3 de antígeno diluido al 1 :40 y con 0,5 cm 3 de suspensión
al 2% de glóbulos rojos de carnero. La mezcla de estos
elementos fuó incubada. durante 75 min a 37,5° utilizándose
para la titulación del suero una. llnidad completa. de
las obtenidas en esta. titulación.
II.- Suero empleado: . El suero fué calentado para su
-inaetivación a una temperatura de 56 ° durante 30 min preparándose
diluciones geométricus que variaron de 1:10 a
1 :10 240 y disponiendo series de tubos con 0,5 cm 3 de estas
diluciones. A cada uno de estos tubos se le agregó una unidad
completa de complemen'to y 0,5 cm 3 del antígeno diluido
al 1 :40, verificándose la fijación durante 18 h a una
temperatura de 4°, al cabo de lus cuales se agregó el sistema
bemoHtico integrado por 0,5 cm 3 de suspensión al 2%
de glóbuios rojos de carnero y 2 unidades de hemolisina
contenidas en un volumen de 0,5 cm 3 , haciéndose la lectura
después de 30 ruin de incubación a 37°.
Simultáneamente con esta prueba se llevaron a cabo
controles del complemento del antígeno del sistema hemolítico
y del poder anticomplementario del suero, usl como
otro control constituido por suero normal de caprino.
El título del suero fué determinado con la mlnima dilución
de éste, que daba la fijación absoluta del complemento,
considerando como negativos aquellos tubos en 'los cuales
había hemólisis paréial o total.
'
- :rviediante el método descrito se hicieron titulaciones de
las dos muestras obtenidaS por coagulación y posteriormente
del suero purificado por aislamiento de la fracción globulínica
específica y restauración posterior del volumen origiriai.
:Este último suero purificaao se -conServó en refrigeración
Il.. 0°: durante 15 dlas antes de su titulación, de tal
forma,que cuando se efectuó ésta se llevó a cabo simultáneamente
y por segunda vez la de,los sueros crudos ya titu
lados y que también se conservaron a O°. '
III. ReSultados: El título del suero de las cabras obtetenido
por eoagulaCión~fué,de 1:640 en la primera titula-o
c.iQp, títlPO ,