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Waleo 3 : Déclarations d'intention (PDF) - Recherche et Technologie

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<strong>Waleo</strong> 3 <strong>Déclarations</strong> d’intention<br />

Acronyme : SCAPAS<br />

Titre : Développement d’un Système de Criblage d’Adn pour la Détection de Protéines Solubles (SCAPAS)<br />

Durée : 48 mois<br />

Promoteur : René Wintjens, Université Libre de Bruxelles<br />

Coord. scient. : Danielle Baeyens-Volant (02-5556780)<br />

Partenaire n˚1 : Prof. Moreno, Galleni, Centre d’Ingénierie des Protéines, Université de Liège<br />

Parrain n˚1 : Delphi Gen<strong>et</strong>ics s.a., Philippe Gabant<br />

Parrain n˚2 : ProGenosis s.a., Patrice Filée<br />

Résumé<br />

Parallèlement aux vastes programmes de séquençage de génomes, des programmes<br />

de génomiques structurales se sont rapidement mis en place voici<br />

une dizaine d’années. Ils ont pour but de déterminer expérimentalement la<br />

structure spatiale de l’ensemble des protéines codées par le génome d’un<br />

organisme donné. C’est un formidable défi pour la communauté scientifique,<br />

essentiel à la bonne compréhension du fonctionnement cellulaire<br />

<strong>et</strong> du mécanisme d’installation de nombreuses maladies. Cependant, obtenir,<br />

en solution <strong>et</strong> en quantité appréciable, une protéine recombinante pour<br />

une caractérisation fonctionnelle <strong>et</strong> structurale reste encore aujourd’hui très<br />

problématique.<br />

Depuis peu, de lourds investissements sont alloués en Europe <strong>et</strong> dans le<br />

monde à la mise en place de plateformes de criblage d’ADN pour l’obtention<br />

de protéines recombinantes solubles. Le développement de telles<br />

plateformes est difficilement envisageable sur un site académique sans une<br />

innovation perm<strong>et</strong>tant de minimiser le coût d’onéreux équipements, <strong>et</strong> surtout<br />

d’éviter de devoir recourir à la robotisation des différentes étapes. Nous<br />

proposons le développement d’un nouveau vecteur d’expression original,<br />

perm<strong>et</strong>tant en une seule étape la sélection de fragments d’ADN codant des<br />

protéines solubles <strong>et</strong> leur surexpression. Ce vecteur s’appuie sur le système<br />

poison-antidote pour la sélection des produits solubles exprimés.<br />

Notre système fonctionnera en deux étapes. Dans un premier temps une<br />

banque de fragments du gène d’intérêt sera générée. Ensuite, un système<br />

de sélection simple <strong>et</strong> efficace perm<strong>et</strong>tra la détection des protéines solubles.<br />

En fait, en travaillant avec des souches modifiées de la bactérie Escherichia<br />

coli produisant un poison, <strong>et</strong> en plaçant l’antidote dans le vecteur portant le<br />

gène d’intérêt, seuls les souches ayant un produit d’expression soluble survivront<br />

car l’antidote n’est pas capable d’accomplir son action si elle-même<br />

n’est pas soluble.<br />

Plusieurs gènes, choisis pour leur grand intérêt scientifique, mais aussi pour<br />

leur difficulté à être exprimés, seront testés afin de valider notre système.<br />

En réunissant un ensemble de compétences fortement complémentaires, le<br />

proj<strong>et</strong> SCAPAS (Système de Criblage d’ADN pour la détection de Protéines<br />

Solubles) veut se donner les clés indispensables à sa réussite. Le<br />

premier parrain industriel pressenti, Delphi Gen<strong>et</strong>ics, s’est spécialisé dans<br />

l’utilisation des systèmes poison-antidote chez les bactéries. Le second parrain,<br />

ProGenosis, développent des outils de biologie moléculaire performants<br />

comme par exemple l’expression de protéines hybrides basées sur<br />

l’architecture moléculaire de la b<strong>et</strong>a-lactamase. Enfin, le Prof. Galleni possède<br />

le savoir-faire <strong>et</strong> l’expérience nécessaires pour assister ce type de proj<strong>et</strong>.<br />

SCAPAS (148) Page 54/66

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