№ 4, - referat.znate.ru

человеческого БТШ70 с расширенным спектром
фармакологической активности.
Материалы и методы
Для модификации ЛПС, целевых антигенов,
активации дрожжевой культуры Saccharomyces
cerevisiae и мобилизации эндогенных БТШ70 в
клетках животных применяли лазерные установки
с мощностью излучения в диапазоне от 10 Вт
до 15 кВт в видимом и инфракрасном свете,
а также широкоапертурный ускоритель электронов
на 190 кэВ. Защитный эффект продуктов
лазерной активации дрожжевой культуры
(ПЛАДК), мЛПС, внеклеточных БТШ70 и их индукторов
изучали на моделях радиационных,
токсических поражений и действия биопатогенов
на мышах линии СВА, BALB (с TLR4-рецепторами)
и С3Н/HeJ (без TLR4-рецепторов). Радиационные
поражения вызывали общим гамма-облучением
(5,5–10,0 Гр), токсические –
острой (однократно 250 мг/кг) и хронической
(10 мг/кг за 20 сут) интоксикацией циклофосфаном,
фосгеном для моделирования токсического
отека легких. Действие биопатогенов изучали
на моделях геморрагического отека легких,
вызываемого ингаляционным заражением
мышей вирусом гриппа H3N2, бактериального
сепсиса (заражение культурой B. Fragilis) и эндотоксического
шока (введение ЛПС Serratia
marcescens).
Влияние экзогенного БТШ70 на показатели
физической работоспособности при экстремальных
физических нагрузках определяли по
показателю максимального времени бега на
тредбане «до отказа», нагрузочные пробы проводили
через сутки в течение 19 сут. БТШ70 (50,
100 мкг/животное) вводили внутрибрюшинно
через 5 мин после завершения физической нагрузки
(отказа от дальнейшего продолжения
бега). По завершении исследований в крови
определяли содержание креатинфосфокиназы
(КФК), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), интерлейкинов
(ИЛ-6, ИЛ-10).
ПЛАДК применяли перорально в течение
28 сут после облучения (интоксикации циклофосфаном)
или заражения мышей вирусом
гриппа H3N2. мЛПС (0,1 ЛД 50 ), БТШ70 (20–
50 мкг) вводили за 30 мин до облучения (через
24 ч после интоксикации), затем ежедневно в
течение 4 сут. Для защиты от сепсиса, эндотоксического
шока и летальной гриппозной инфекции
вводили мЛПС и БТШ70 за 1 ч и 14 сут до
заражения (интоксикации). Критерием защитного
эффекта ПЛАДК, мЛПС и БТШ70 служили
выживаемость, продолжительность жизни после
облучения (интоксикации), динамика мас-
Биологические проблемы
сы тела, изменения гематологических показателей,
иммунного статуса, реакция торможения
миграции лейкоцитов с КонА, Г КСФ, Э-КСФ,
ИЛ-1, ИЛ-2, вакцинами на основе H3N2-, H1N1-
, H5N1-антигенов и вакциной «Ваксигрип».
Субпопуляционный состав лимфоцитов определяли
с помощью мышиных моноклональных
антител производства фирмы «Becton
Diskinson» на проточном цитометре. Уровень
цитокинов оценивали методом иммуноферментного
анализа с использованием специфических
компонентов к цитокинам мышей производства
фирмы «R&D Systems».
Выявляли изменения массы селезенки и содержание
в ней БТШ70. Уровень цитокинов определяли
методом иммуноферментного анализа.
Влияние лазерного излучения на эффективность
вакцины «Ваксигрип» изучали при сочетании
действия лазера на кожу ушной раковины
мышей с внутрикожным введением вакцины. Для
сравнения вводили 50 мкг БТШ70 в зону вакцинации.
Параметры лазера на парах меди: длина
волны 510 и 578 нм; экспозиция 120–180 с; P =
0,5–3,0 Вт/см 2 . Через 28 сут после вакцинации
определяли титр противогриппозных антител,
показатели клеточного иммунитета. В коже уха
мышей, клетках и сыворотке крови определяли
БТШ70 с помощью методов иммуногистохимии,
иммуноферментного анализа, иммуноблотинга.
Число и активность клеток Лангерганса
кожи определяли гистохимическим методом и
используя метод электронной микроскопии.
Результаты и их анализ
Модификация биомолекул физическими
факторами высокой интенсивности и их применение
в сочетании с БТШ70. В результате проведенных
экспериментов установлено, что воздействие
СО 2 -лазера на капельную струю с полисахаридами
экстрактов исландского мха и
морской травы Zetraria вызывает замещение
высокомолекулярных (80–400 кД) на низкомолекулярные
(20–60 кД) фракции. Хроматографические
исследования с использованием белков-свидетелей
с известной молекулярной массой
показали, что обработка мЛПС пучком электронов
(50–150 кГр) увеличивает содержание
низкомолекулярных фракций (1,5–5,0 кДа) в 18–
25 раз, при сохранении иммуногенных свойств
и одновременном снижении токсичности в 1,5–
2,0 раза.
Защита от сепсиса и эндотоксического
шока. Выявлено, что мЛПС защищает мышей
линии СВА от микробного сепсиса и эндотоксического
шока, вызываемого летальными дозами
мЛПС. Защитный эффект мЛПС зависит
Медико-биологические и социально-психологические проблемы
безопасности в чрезвычайных ситуациях. 2011. № 4
79